荧光定量分析选择波长 荧光分析的定量公式
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1、某些物质受紫外光或见光照射激发能发射比激发光波较荧光物质激发光谱荧光发射光谱用作该物质定性析激发光强度、波、所用溶剂及温度等条件固定物质定浓度范围内其发射光强度与溶液该物质浓度比关系用作定量析荧光析灵敏度般较紫外光光度或比色高浓度太溶液自熄灭作用及由于液面附近溶液吸收激发光使发射光强度降导致发射光强度与浓度比故荧光析应低浓度溶液进行所用仪器荧光计或荧光光光度计按各品项规定选定激发光波发射光波并配制照品溶液供试品溶液由于易测定绝荧光强度故荧光析都定条件用照品溶液测定荧光强度与浓度线性范围再每测定前用定浓度照品溶液校定仪器灵敏度;相同条件别读取照品溶液及其试剂空白荧光读数与供试品溶液及其试剂空白荧光读数用式计算供试品浓度:R-RC=×CR-R式 C供试品溶液浓度;C照品溶液浓度;R供试品溶液荧光读数;R供试品溶液试剂空白荧光读数;R照品溶液荧光读数;R照品溶液试剂空白荧光读数荧光析浓度与读数线性较窄故(R-R)/(R-R]>)应0.50~2.0;超应调节溶液浓度再测易光解品种使仪器灵敏度定标准确避免激发光照射影响荧光强度选择种激发光发射光波与近似光稳定物质配适浓度溶光的波长越小,光子能量越大.荧光是由激发光激发的.激发光的光子打到荧光物质上,经过一系列变化,激发出荧光.从能量角度看,一定有:激发光光子的能量>荧光光子的能量,否则多余的能量从哪来?。
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