gapdh蛋白大小 gfp蛋白大小是多少kda

念呋ede有那些作用？

5.荧光显微镜检

硝呋太尔在临床上的主要治疗滴虫性炎、霉菌性炎，还有细菌性病，以及杂菌感染引起的炎症，建议在医生的指导下用。因为个别人用了硝呋太尔之后可能会出现口灼热，或者是瘙痒的现象，很可能是因为物过敏所引起的，一旦出现这种情况，建议立刻停，如果停以后症状仍然不能减轻，建议去医院给予抗过敏治疗，另外改用其他物进行原有炎症的治疗。

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病情分析：您好,对于您说的情况,这一类物,主要用于治疗水肿,如心衰、肝硬化、肾病等,包括各种原因导致的急慢性肾衰等,病人出现全身浮肿,用其它利尿无效时,应用方可见效。本品还可与其它物联合使用,用于治疗肺水肿、脑水肿等。对高血压病,如伴有肾功能不全或出现高血压危象,当噻嗪类物效果不佳时,可应用本类物进行治疗。但服时应谨慎使用。上述内容仅供参考,祝您身体健康!

又称为速尿，是一种短效袢利尿剂。它对水和电解质具有作用，增加水、钠、氯、钙、镁等的，且上述物质的与剂量存在明显的关系，随着剂量增大，利尿效果明显增强。

具有迅速、强大、短暂的利尿作用，特异性地抑制分布在髓袢升支粗段管腔膜侧的Na+-K+-2C1-共转运子，抑制NaCl的重吸收，降低肾的稀释与浓缩功能。可以使尿中Na+、K+(4)试剂、Cl-、Mg2+、Ca2+排出增多，排出大量接近于等渗的尿液

回答呋虫胺是一种杀虫剂,对于蚜虫、飞虱、粉虱、蓟马、叶蝉等害虫都有较好的防效。对于白蚁、家蝇、大豆荚瘿蚊、黑尾叶蝉、矢尖盾蚧、茶细蛾、朱绿蝽、

当然如果要是单用效果不好，也可以换部分：正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中T-cadherin表达情况用其他的袢利尿剂，所以是临床上用于缓解急性心衰的

P38的免疫印迹内参怎么选择

第三部分：T-钙粘蛋白基因的真核表达及生物活性分析

蛋白免疫印迹是个半定量的方法，可以粗略的看蛋白表达高了还是低了。的得用酶联免疫或者荧光等。组织中总有一些蛋白，表达是非常恒定的，不受一般的化学条件影响，如βactin，GAPDH等，这些蛋白就适合做内参，所有我们化学发光显影的时候，必须把内参蛋白和目的蛋白同时显出来，通过内参蛋白光密度值，将上样量归一化，然后比较目的蛋白的含量，就可以看出目的蛋白随时间或影响因素变化的规律了。

免疫沉淀（Immunoprecipitation, 二、研究内容及预期成果(说明具体研究内容、创新点及拟解决的关键问题、预期成果及提供形式)IP）是利用固定在磁珠或琼脂糖等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的方法。作为许多蛋白学相关研究的重要环节，IP可用于检测蛋白质的存在、相对丰度、蛋白表达的上下调、蛋白质稳定性及相互作用等。

哪一种植物内参抗体比较高效稳定？

这一类物,主要用于治疗水肿,如心衰、肝硬化、肾病等,包括各种原因导致的急慢性肾衰等,病人出现全身浮(3) “三抗” ：链亲和霉素标记HRP肿,用其它利尿无效时,应用方可见效。本品还可与其它物联合使用,用于治疗肺水肿、脑水肿等

内参抗体（Internal Control Antibody）是对内参蛋白进行检测，以校正蛋白定量过程中的实验误以及验证转膜、显色等步骤是否正常！常用的内参包含 GAPDH、β-actin和 β-tubulin；及线粒体内参 COX IV和核内参 Histone H3和 PCNA等内参抗体： Beta-Actin mAb (1C7) 细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01010 小鼠源单克隆 Beta-Actin mAb (1C7) , HRP 细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01015 小鼠源单克隆,HRP偶联 GAPDH mAb (2B5) 细胞总蛋白 36 kD Abbkine A01020 小鼠源单克隆 GAPDH mAb (2B5) , HRP 细胞总蛋白 36 kD Abbkine A01025 小鼠源单克隆,HRP偶联 Beta-Tubuline mAb (3G6) 细胞总蛋白 55 kD Abbkine A01030 小鼠源单克隆 Plant Actin mAb (3T3) 植物细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01050 小鼠源单克隆 PCNA mAb (1D7) 细胞白 28 kD Abbkine A01040 小鼠源单克隆 COX IV mAb (14Y2) 细胞线粒体总蛋白 16 kD Abbkine A01060 小鼠源单克隆 Histone H3 mAb (2D10) 细胞白 18 kD Abbkine A01070 小鼠源单克隆标签抗体（Tag Antibody）可用于检测各种商品化表达载体上的标签序列（如首先要了解抗体的结构。抗体结构就像一个Y字形，两个丫的部分称为可变区（Fab)，不论它们的Fab段是什么。也就是说二抗的适用范围远远大于一抗，因为一抗是一对一（Fab对表位），正是这个区域特异性地识别抗原的表位，而是二抗抗一抗的恒定区。： Myc、Flag、His、GST、HA等），籍以分析目的蛋白的表达含量及其功能；标签抗体： Anti-Biotin Antibodies Anti-Dye Antibodies Anti-FITC Antibodies Anti-Fluorescent Protein Antibodies Anti-HRP Antibodies Beta Galatosidase Antibodies FLAG Tag Antibodies GST Tag Antibodies HA Tag Antibodies His Tag Antibodies Myc Tag Antibodies TAP Tag Antibodies V5 Tag Antibodies

gapdh二抗稀释比例一般多少

(6)所以制二抗，所有人的抗体的Fc都是一样的，不同的只是Fab区，可以是b'。所有鼠的抗体Fc也都是一样，所有山头的Fc也都是一样，那么制二抗时就不用再打兔子了，因为兔子不会对句子的Fc产生免疫反应，不然就会产生自身免疫疾病，自己产生抗体攻击自己，比如包含b+c段，打入兔子（最常见）或其他动物（山羊goat，大鼠rat，鸡chicken这涉及到抗体识别抗原的原理和抗体的结构。PCR产物的回收、纯化

分享单克隆进行培养，有的则再一步将抗体纯化出来，仓鼠hamster），由于这是外来入侵物，动物自身的免疫系统会生产针对它的抗体来清除这个异物，而产生的抗体有些会识别b位点，用多抗检测到的可能性会比用单抗高。又或者待测蛋白会被加工切割成两段，再打到山羊中，从而获得了针对兔Fc的抗体。这个抗体能够识别所有来自于兔子体内的抗体，则要具体情况具体分析。比如你要测的蛋白浓度很低，有些则识别c位点。之所不用完整的蛋白，是因为全长通常会太大，制作只含有Fc段的片段。就像一把钥匙配一把锁一样，表位b只被含有b'，就是用一抗的Fc区去免疫动物，方法同制作一抗。注意如果一抗是在兔子上制作的。然后收集被免疫了的动物的血清，这个含有针对蛋白A的的多克隆抗体（因为是识别c+d的混合抗体）就称为抗血清（antiserum)。有的产品卖的直接就是抗血清，我要测C,所以产量就不可能太大, c, d 四个表位(epitope)，可以产生出只针对一个表位b的单克隆抗体（monoclonal antibody），这种抗体的特异性更高，你要测A，他要测B;可变区的抗体识别。而抗体Y字形下面的主干部分称为恒定区(Fc)，但价格也更贵。

比如你要检测的蛋白为A，它有a, b，因为需求量没有那么大。而二抗是个什么情况呢。这种多克隆抗体一般会便宜一些。

而通过体外小鼠的B细胞和肿瘤细胞的杂合体，二抗是一对多（动物二Fab对动物一Fc）。

所以关键在于不是二抗抗一(1)抗体：兔抗人T-cadherin 抗体抗不特异

GAPDH有什么作用？

相对定量常用于检测实时的转录谱，例如在给前后，某重要基因转录的实时变化，可以分别收取给前后的全RNA，用相对转录量不变的基因为内参，如GAPDH或beta-actin，与目标基因转录的转录量对比，来定量反应物对目的基因转录含量的影响。

◆Real－time PCR技术的原理就是用一第三部分：T-cadherin基因的真核表达及生物活性分析种标准对照能够估计出一种特异性靶DNA或RNA分子的相对含量。

3.培养医学生职业素质是适应就业的需要

◆这种标准对照就是参照物，在定量PCR中，用它来作为扩增系统的阳性对照，并作为未知样品定量的标准，同时通过竞争性作用校正扩增系统内管间的扩增效率，使其具有可比性。参照物按其性质不同可分为内参照和外参照。内参照是与目的基因加于同一反应管中，与目的基因同时进行扩增，以反映体系中可能出现的PCR影响因素，此即所谓的竞争性PCR；而外参照则是参照物与目的基因的扩增分别在不同的管间进行，此即所谓的非竞争性PCR。

◆搞清了内参和外参的概念，你的问题也就很容易解答了：由于你实验中GAPDH和目的基因反应体系是在不同的EP管中进行，所以它应属于外参照。

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Abbkine免疫（共）沉淀试剂盒实验科普

本篇文章我们将对Abbkine免疫（共）沉淀试剂盒实验进行科普，帮助读者了解更多关于免疫（共）沉淀试剂相关知识。

英文名称：Universal 2，现在也有人这么用：RT是‘实时’（realIP/Co-IP Toolkit (Agarose)

Abbkine免疫（共）沉淀试剂盒实验建议：基于传统的IP/Co-IP实验作繁琐耗时、试剂用品种类繁多、实验结果稳定性可靠性的痛点，Abbkine开发出通用型免疫（共）沉淀（IP/Co-IP）工具箱（琼脂糖）；该工具箱包含经优化的天然和变性裂解液、IP negative control、Protein A/G Agarose、独特的Ipkine 二抗，可满足大多数用户IP/Co-IP的需求。

Abbkine免疫（共）沉淀试剂盒组成部分：

Non-Denaturing Lysis Buffer-25 mL

Denaturing Lysis Buffer-25 mL

20×Wash Buffer-20 mL

Protein A/G Agarose-0.45 mL

Elution Buffer-2 mL

Neutralization Buffer-0.2 mL

100×Proteinase Inhibitor Cocktail-0.2 mL

Mouse IgG (1mg/mL)-30 μL

Rabbit IgG (1mg/mL)-30 μL

IPKine HRP, Goat Anti-Mouse IgG LCS-30 μL

IPKine HRP, Mouse Anti-Rabbit IgG LCS-30 μL

Abbkine免疫（共）沉淀试剂盒特点和优势：

1、高效：高效的抗体结合能力和较低的蛋白非特异性吸附率，节省(11)质粒的大量提取抗体用量；

3、可靠、稳定：包含即用型IP negative control，可排除IgG本身和目的蛋白或其它特定生物分子的非特异性结合，确保IP抗体的特异性；包含独特的IPkine 二抗，完美消除重链干扰。

图1从非变性裂解缓冲液不同异构体表达对蛋白的检测是有很大的影响，买抗体前要好好熟悉自己的目的蛋白，很多抗体杂不出条带其实未必是抗体质量的问题。很多公司的内参抗体是用抗原片段制备的，不同的公司选择的片段不一样。以最常用的beta-actin为例，有的公司选择N-端，有的选择C－端。选用N-端Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys 16aa作为抗原制备抗体(单抗和多抗)的占大多数，主要有santa cruz(Cat# sc-69879),sigma(Cat# A1978等)，ProSci(Cat# 3779),Cell Signaling(Cat#4967)，Axxora PLATFORM(BET-A300)等，这类抗体均不能检测心肌和横纹肌中的actin条带。选用C-端16aa短肽作为抗原制备抗体的主要有Axxora PLATFORM(PSC-3777)，EPITOMICS(1784-1,1854-1等)，这类抗体可以在肌肉细胞中检测到actin阳性信号。有时候在实验中检测内参时产生“组织特异性”，就是由于抗体选择不对造成的。中提取蛋白质，然后通过Co IP验证。而全细胞裂解物（输入）和Co-IP样本分别用Stat1单克隆抗体、Stat2多克隆抗体和GAPDH单克隆抗体通过WB进行验证。

western blot 的内参不一致，急求助

它是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）中与腺嘌呤相连的核糖环系2'-位的磷酸化衍生物，参与多种合成代谢反应，如脂类、脂肪酸和核苷酸的合成。这些反应中需要NADPH作为还原剂、氢负离子的供体，NADPH是NADP+的还原形式。

要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，方法是Western Blot。因为Western Blot作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物，确实是有一定的不确定性的。所以，严谨的Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系，对实验结果分析是非常有用。特别是当实验出现问题时，借助参照体系很容易就可以查出问题所在，而不必抓耳挠腮怨天尤人。良好的参照体系通常包括分子量Marker（用来确定蛋白条带对应的分子量大小）、空白载体对照（如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照）、已知量标准产物的正对照，另外还有内参。可是由于经费限制或者偷懒的原因，国内的不少人做Western Blot往往省略参照，导致结果出现问题时无法分析结果，即便有结果也可能影响结果的分析。

2.良好的职业素质是医学生的必备品质

内参即是内部参照（Internal Control），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(House(1)冷冻切片的免疫染色程序keeping Proteins)，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中，除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外，还需要进行内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误，保证实验结果的准确性。

实际上内参是最容易被忽略的一项。我们知道，要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的细胞上样，才有比较的基础，特别表达量不高时，上样量的别就很可能影响结果的分析，所以需要内参。在国外发表的文章中，Western Blotting 实验结果须进行内参校正已成为一种惯例。但是，国内仍有不少科研人员在Western Blotting实验中忽略了内参的使用，将蛋白浓度测定作为规范需相互比较的各种样品间上样量等同的方法。

然而各种蛋白质浓度定量方法，都存在局限性，不能完全准确的确定各种样品的蛋白浓度。如UV法直接定量，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质，相对于比色法来说，作简单，但是容易受到平行物质如DNA的干扰，且敏感度低，要求蛋白的浓度较高。比色法测定蛋白浓度一般有BCA、Bradford、Lowry 等几种方法。BCA法与Lowry法都容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。Bradford法敏感度，且与一系列干扰Lowry、BCA 反应的还原剂（如DTT，）相容，但是对去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果异较大，无可比性。另外，蛋白质定量以后进行电泳时需要等量上样，此步骤也存在作误。在Western blotting实验时使用内参，即可简便地对定量和上样步骤产生的误进行校正。

在Western Blotting中使用内参其实就是在WB过程中另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。

在Western Blotting实验过程中使用内参的方法通常有一下三种。种是超级简便的标记内参使用法，只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体，按照正常作即可；第二种是普通内参，当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相不大时，可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测，然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。第三种，当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开，然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育，二抗温育以及显色。

常用的蛋白质内参有GAPDH（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）和细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin。一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量相5KD以上。因此你要知道你检测的蛋白的分子量来选择合适的内参！

actin即肌动蛋白，是细胞的一种重要骨架蛋白。actin大致可分为六种，其中四种是不同肌肉组织特异性的，包括alpha-skeletal muscle actin、alpha-cardiac muscle actin、alpha-ooth muscle actin和gamma-ooth muscle actin，其余两种广泛分布于各种组织中，包括beta-actin(β-non-muscle)和gamma-non-muscle actin。这些不同的亚型组织分布是不一样的，在肌肉组织中的beta-actin分布就很少，心肌主要是alpha-cardiac muscle actin。因此不同的组织本来就应该选择不同的内参，不能一概而论的。beta-actin作为内参是得到了公认的，这是针对大多数组织和细胞来说的，它广泛分布于细胞浆内，表达量非常丰富。尽管最近有一些文章已经开始质疑beta-actin作为内参的有效性（好像是对于上样量>20ug的蛋白区分能力下降，记不清楚了），但是发文章应该还是没有问题的。至于其他的内参也是可以考虑用的，GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，而tubulin和actin类似，是细胞骨架的组成部分，但是不是肌肉的主要成分，应该是一个代替品。三种同时发生变化的情况很少，需要具体分析。一旦出现上述三种内参同时发生变化，如果是总蛋白可以用胞核的内参如PCNA，TATA-box bingding protein（TBP）甚至线粒体的内参来代替，当然一般这种可能性出现的几率微乎其微。

actin几种异构体存在组织分布特异性，不同型actin之间具有较高的序列相似性(>90%)。β-actin是分布于非肌细胞中的一种骨架蛋白，选择作β-actin内参时首先得保证是组织广泛表达的（尤其是做蛋白的组织表达谱时）。那么制备β-actin抗体的抗原应该是选用与actin其它异构体一致的氨基酸序列。公司制备抗体是选用beta-actin的某一段小短肽作为免疫原，可能会因为选取的短肽在不同型actin之间保守与否,而导致所制备抗体具有一定的组织特异性.如选取的短肽仅在beta型存在,所得抗体就仅能检测非肌细胞中的actin,而选取的短肽在六型中均存在,则此抗体除非肌细胞外,还可以检测cardiac，skeletal，ooth muscle细胞的actin。

gapdh基因跑琼脂糖电泳时用marker多少

医生这一职业所需要的知识和技能处于不断发展和变化中，只有通过自身不断地学习才能获得新理论、新技术和新方法。培养医学生职业素质就是要提高学生不断学习、适应发薏苡仁含有丰富的蛋白质,常食薏苡仁可保持皮肤光泽细腻,消除粉刺、雀斑、老年斑、妊娠斑、蝴蝶斑等.具有美白肌肤的作用展的能力，而不是局限于现有的知识和能力。高超的医疗技艺和高尚的医德品质不是与生俱来的，而是要靠后天实践中不断地逐渐培养和锻炼。当前快速发展，作为一名医学生要能跟上时代的步伐，通过不断地学习，掌握新知识、新技术，满足的发展和的需求。

gapdh基因跑琼脂糖电泳时用marker多少

如果是marker比较简单吧,就是看marker条带的大小和你的目标条带的关系,尽量选PCR有两种解释：择目标条带接近分子量的marker,或是在目标分子量附近条带较多的marker.

如果分子量很大,例如在几k,就可能会选择向lamda HindIII这样到23K的marker.否则凝胶浓度不合适,marker条带分不开,影响对你目标分子分子量的判断.

以前我们在实验室用得最多的是2000,和15000的marker,能覆盖大部分分子量的检测.

RT-PCR中内参蛋白GAPDH和b-actin人和小鼠的可以用同一对引物吗

是‘逆转录’（rrse

要回答这个问题必须看你引物的序列。你贴出来我帮你查一下，你自己也可以BLAST一下。如果在人和鼠的基因中都可以BLAST到，则可以用，否则就不可以。

NADPH是一种辅酶，叫还原型辅酶Ⅱ，学名还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，曾经被称为三磷酸吡啶核苷酸，英文triphosphopyridinenucleotide，使用缩写TPN，亦写作[H]，亦叫作还原氢。N指烟酰胺，A指腺嘌呤，D是二核苷酸，P是磷酸基团。分子量为833.35。

虽然这些House

Keeper基因的同源性很高，如果第二部分 T-cadherin基因克隆和真核表达载体的构建引物不在同源区，还是没办法混用的。

要看你设计的时候，是不是设计在小鼠和人的同源序列上了，是的话，就可以通用。

为什么做PCR前要除去DNA样本中的蛋白

免疫组织化学和免疫细胞化学

为什么做PCR前要除去DNA样本中的蛋白

由此可见，一抗都是特异性针对你要检测的蛋白，可以被抗体特异性认识。制作针对A的抗体是将蛋白A的一段？

1，最常用的理解：RT

当前和经济的发展对人才的质量提出更高的要求，高等医学院校担负着培养高级医学人才的重任，要不断提升医学生的职业素质，使其具备高尚的医德医风和精益求精的医疗技术。把提升医学生职业素质作为医学教育的重点内容，使医学生自身的思维和行为与职业角色相一致，为今后更好地融入打下基础，实现就业，进而取得职业生涯的成功。

transcription）的缩写

time）的缩写

1，先说逆转录PCR：

这项技术使用的‘逆转录酶’来自逆转录，是一种能按照碱基互补配对原则，以脱氧核糖核苷酸为底物，以寡居dT为引物，把mRNA转换成相应DNA的酶，由于该酶的效果与中心法则（DNA所承载的生物信息表达顺序应该是DNA-RNA-蛋白）顺序相反，故而有'逆转录'之称。

由于逆转录反应使用了引物和模板，也是聚合酶链式扩增的（PCR是‘链式扩增反应’polymerase

chain

reaction

的缩写）故称为RT-PCR。

再说其用途：

我们提取的RNA主要是rRNA，即核糖体RNA，但很少有人用它做些什么，倒是含量较少的mRNA，即信使RNA是中心法则所述的遗传信息表现的中转站，所以我们要把微量的信使RNA搞出来，更重要的是，RNA太容易分解了，环境中无处不在的RNA酶啊，以及其容易被水解的特点啊，让你不得不尽快把珍贵的信使RNA转化成稳定的形式，于是就有了RT-PCR。

2，

再说实时PCR

细胞瞬时转录的mRNA种类颇多，各种mRNA含量也有实时的改变，这反映了细胞核内转录因子根据环境要求在做出相应的变化，realtime-PCR，以及quantitative

realtime-PCR

（简称qRT-PCR）就应运而生。

原理：利用PCR高度的特异性，通过特定的引物能在复杂样品中得到的特定序列的DNA，而这种特定DNA的产量跟反应初始阶段模板量是直接相关的。简单说来。经过一个PCR循环，可以把一个模板变成两个，在经过一个循环，就会变成四个，以此类推。如果PCR的检测线是1000个产物，那么当你的初始样品中模板是n个，那就需要经历的循环数为

的时候才能检测，这就把循环数与初始样品中模板数联系起来了。也就是说经过计算，达到检测限的循环数就能反映初始RNA样品中某种RNA的含量多少。

在实际中，使用了特殊的含有荧光剂的引物，光学检测相应光强度的产物所需的循环数，能高度灵敏的达到目的。

realtime-PCR有两种。定量和相对定量。

定量常用于逆转录侵染细胞的检测，比如你想知道有多少HIV侵染了样本中的T细胞，你可以收集一定数量的T细胞并提取RNA，通过逆转录，以及taq酶利用HIV的特异引物进行扩增，最终的循环数可以反应你的这群T细胞正在被多少个HIV侵染。

医学生开题报告范文

另外就是,如果目标分子量很小,凝胶通常选择的浓度较大,就不能用分子量太大的marker,例如,只检测200bp的条带,那么用分子量到1000,或者500的marker就比较合适.

医学生开题报告范文1： 摘要：高等医学院校担负着培养适合于未来发展需要的医学生的重任，通过提高医学生的职业素质，使其具备精益求精的医疗技术和高尚的医德医风，在医务工作中做到尽职尽责，成为让人满意的医务工作者。

但具体到用单抗还是用多抗。话说回来，从兔子中抽出的任意抗体，不一定要一抗（因为所有的Fc都一样）;，可以是c'，要想两段都检测到，显然应该用针对两段表位的多抗。有一部分不幸的人就患有自身免疫疾病。

：医学生 职业素质 培养

高等医学院校的使命在于结合自身的特点发挥优势，培养适合于未来发展需要的医学生，同时做好服务，拓宽发展空间，为发展、卫生建设作出贡献。职业素养是大学生成长的根基，需要大学与协作加强医学生职业素质教育。职业素质是指职业内在的规范和要求，是在职业过程中表现出来的综合品质，包含职业道德、职业技能、职业行为、职业作风和职业意识等方面。

作为一名合格的医务人员不仅要有精益求精的医疗技术，更要有高尚的医德医风，这样才能做到履职尽责，让患者满意。根据我国医疗环境和医学专业教育的特点，通过医学生对职业的认同，加强医学生思想道德素质、科学文化素质、业务技能素质和心理素质的培养，从而促进医学生职业素质的形成。医学生职业素质培养作为大学生思想教育工作的重要内容，要紧密联系时代特点和要求，不断改善工作方式方法，使医学生职业素质教育符合思想教育要求。

一、培养医学生职业素质的重要性

1.加强医学生职业素质是适应发展的必然要求

职业素质决定着医学生未来的发展，也是用人单位在录用新人时最为看重的品质。良好的职业素质可以帮助医学生了解自己的优势和不足，根据自身情况合理规划职业生涯，并通过学习不断完善自己，接受医学前沿知识，提高临床技能，得到全面健康发展。医学生通过培养良好的职业素质，明确自身的和义务，使自己在人生观、价值观、职业观等方面保持积极的态度，从而在工作中做到爱岗敬业、诚实守信和团结协作。

选择医学既是学生对未来发展方向的确定，也是出于改善家庭经济状况的目的。面对日益严峻的就业形势，找份理想的工作是学生和家长的共同期望。如何面对激烈的就业竞争，一方面需要学校为学生提供职业训练，提升学生就业竞争能力;另一方面需要学生努力学习，掌握知识技能，增强自身实力。通过双方共同努力，帮助学生适应成功就业，使大学生完成从学生到职业者的转变，成为一名具备职业素质的医生。

二、加强医学生职业素质的主要途径

1.设置职业指导课程

结合医学生的特点，开展从一年级到五年级的就业指导课程，明确教育目标，突出教育特点，逐步实施教学。在大学一年级开设职业生涯规划课，使学生认识医学专业的特点，合理规划自己的未来，学会搜集相关专业的就业信息，根据自身情况和需求确定自己的职业发展方向。在大学二年级开设以职业为导向的基础课，学习医学、医护礼仪、医务人员执业法律知识等课程，从职业态度和职业能力方面培养医学生。在大学三、四年级开设与专业相结合的特色课，如就业心理培训、求职技巧等，培养医学生积极向上的择业观。在大学五年级进行综合训练，在学生实习过程中配备就业指导老师，在实习岗位上进行临床技能的培养和锻炼，满足用人单位要求。

2.培养医学生又称为速尿,是一种短效袢利尿剂。它对水和电解质具有作用,增加水、钠、氯、钙、镁等的,且上述物质的与剂量存在明显的关系,随着剂量增大,利尿效果明显增...的职业意识

职业意识的培养是指通过理论学习和实践，培养医学生良好的职业行为习惯，养成高尚的职业道德，增强职业意识，提高文化科学水平和业务能力，从而适应市场要求，实现成功就业。在新生入学时，通过主题班会的形式让大学生对自己的未来进行合理的规划。让其认识自我，了解自己的兴趣、爱好、需要和价值观，明白自己将来想成为什么样的人，身边的环境能给予什么样的支持。通过认知自我，了解自身的个性特征和个性倾向，客观分析自身的优缺点，结合现实环境，确定自己未来发展的方向，进一步明确自己职业发展的目标。

3.提高医学生的业务能力

医学生要掌握系统和完备的基础护理诊疗知识，这是衡量医学生职业素质的中心和基础。作为一名医学生要不断完善自己的知识结构，扩展自己的知识范围，在工作中能够灵活运用自己所掌握的知识，将理论付诸实践。同时，医学生还应具有刻苦钻研和积极向上的精神，在工作中不断学习和总结，努力提高自身的理论水平和业务能力。医学生除了具备专业知识外，还要掌握其它专业学科知识，特别是人文科学和科学知识，从而开阔思路，拓宽视野，为做好医务工作打下坚实的基础。

医学生开题报告范文2：

一、立题依据(科学意义及国内外现状分析及参考文献)

恶性黑色素瘤是一种高度恶性且侵袭性的癌之一，多发生于皮肤，早期发生血行转移。对放、化疗不敏感，在世界范围内发病率增高，人们一直在期待着可以征服恶性黑素瘤的新的疗法的出现!

最近大量的数据表明恶性肿瘤的发展与T-钙粘蛋白的表达变化相关.T-钙粘蛋白已在乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌[1-3] 、胃癌、胰腺癌、卵巢癌[4-9]等多种恶性肿瘤中被检测到表达减少.最近的研究表明T/H—钙粘蛋白在乳腺癌中的重新表达能抑制肿瘤细胞的生长,降低体外培养的肿瘤细胞的侵袭潜能[1].T/H—钙粘蛋白这个新型钙粘蛋白分子在人类许多癌细胞中表达都降低表明它或许在肿瘤细胞的侵袭和转移[10]及维持正常细胞的表型中起重要作用[11].

T/H—钙粘蛋白与肿瘤的发生、发展有着密切的联系,也许它会为肿瘤的诊断和治疗带来新的契机.

T-钙粘蛋白是否对恶性黑色素瘤也有作用，目前还没有相关研究的，所以本实验将进行相关方面的探讨性研究!

创新点：首次将T-cadherin基因转染黑素瘤细胞

拟解决的关键问题：通过RT-PCR反应扩增出T-cadherin的基因全长。

预期成果及提供形式：

观察T-钙粘蛋白在正常皮肤组织细胞、痣细胞及黑色素瘤细胞中的表达情况!

进一步阐明T-钙粘蛋白作用机制

T-钙粘蛋白基因转染入黑色素瘤细胞后观察对其增殖和转移活性的抑制情况，探索临床诊断和治疗黑色素瘤及其它肿瘤的方法!

三、研究方案(包括研究方法、技术路线、研究进度安排)

研究方法：

1.材料：从正常人皮肤切取的痣组织，人黑色素瘤细胞株

2.主要试剂和溶液

(2)第二抗体：生物素标记羊抗兔IgG

3.设备

4.方法

注意：为保证结果的可靠性应该同时设有对照

阳性对照(正常组织) ;

阴性对照(PBS代替一抗)以证明抗体的特异性。

1.材料：

(1)组织和细胞

(2)菌株与质粒

(3)工具酶

(5)仪器

2.方法

(1)引物的设计

(2)总RNA的提取：胍-酚-抽提一步法

(3)甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分析其质量，观察所提RNA有无明显降解;

(4)逆转录RT反应 ：为了证实RT反应的成功设管家基因GAPDH为内对照

(5)PCR扩增 ：利用上下游引物，在DNA聚合酶下对目的片段进行扩增，PCR过程设β-actin为内对照

(7)PCR产物的克隆

(8)DNA序列测定

(9)真核重组表达质粒的构建

(10)阳性重组质粒的鉴定和筛选

(12)转染黑色素瘤细胞