信号转导通路 简述mapk信号转导通路

什么是信号转导？

分子开②活化型G蛋白（Gs）或抑制型G蛋白（Gi）；③ 腺苷酸环化酶AC：跨膜12次。在Mg2+或Mn2+的存在下，催化ATP生成cAMP。在哺乳动物中，至少发现了8种AC（AC1-AC8），它们都能被胞内的Gs激活，不同的AC还受到胞内其它分子的激活和抑制作用。④蛋白激酶A（Protein Kinase A，PKA）：由两个催化亚基和两个调节亚基组成。cAMP与调节亚基结合，使调节亚基和催化亚基解离，释放出催化亚基，激活PKA发挥效应。如在脊髓背角神经元中，α2－受体通过AC-cAMP-PKA通路上调GlyR；在纹状体神经元上，D1受体通过AC-cAMP-PKA通路和一系列复杂的途径上调DMNAR。此外cAMP可以直接作用于离子通道产生快速效应，如环核苷酸门控离子通道HCN可被胞内cAMP上调或直接激活。 ⑤环腺苷酸磷酸二酯酶(PDE）：降解cAMP形成5’-AMP，起终止信号的作用。关

信号转导通路 简述mapk信号转导通路

信号转导通路 简述mapk信号转导通路

调控蛋白构成细胞内 GTP 酶超家族,包括三聚体 GTP 结合蛋白和如 Ras 和类 Ras 蛋白的单体 GTP 结合蛋白。所有 GTP 酶开关蛋白都有两种状态:一是与 GTP 结合呈活化(开启)状态,进而改变特殊靶蛋白的活性;二是与 GDP 结合,处于失活(关闭)状态。 GTP 酶开关蛋白通过两种状态的转换控制下游靶蛋白的活性。信诱导的开关调控蛋白从失活态向活化态的转换,

(2)蛋白激酶/蛋白磷酸酶

一类最普遍存在的分子开关机制是通过蛋白激酶( protein kinase )使靶蛋白磷酸化,通过蛋白磷酸酶( protein phosphatase )使靶蛋白去磷酸化,从而调节靶蛋白的活性, 蛋白质磷酸化和磷脂酶C偶联通路：信号通路：受体- G蛋白（Gq）- PLC-β- IP3&DAG去磷酸化可为细胞提供一种“开关”机制,使各种靶蛋白处于“开启”或“关闭”的状态 。蛋白质磷酸化和去磷酸化可以改变蛋白质的电荷并改变蛋白质构象(2)类固醇激素作用的非基因调节机制类固醇激素的快速作用,是由细胞膜上的受体介导的,称为类固醇激素的快速非基因效应。含氮激素主要通过G 蛋白耦联受体-第二信使途径和酶耦联受体途径进行信号转导,类 固醇激素则是通过基因调节机制及非基因调节机制发挥作用。但激素的信号转导机制十分复杂,有的激素也可通过多种机制发挥作用。,从而导致该蛋白质活性的增强或降低,是细胞内普遍存在的种调节机制,蛋白激酶和蛋白磷酸酶在几乎所有的信号通路中被普遍使用。在代谢调节、基因表达、周期调控中具有重要作用

(3)钙调蛋白

信号转导的内容

磷脂酰肌醇途径

《信号转导(原著第2版)(影印版·导读版)》作为有关细胞信号传递过程的一本书，《信号转导》（原著第二版）详细介绍了确立近代和当前科学发现的起源、关键观察和实验。作者从历史概况谈起.讲述了化学信使的概念如何在20世纪初期产生并逐渐形成目前对激素、细胞因子、神经递质和生长因子作用的理解。之后，进一步介绍了由经典受体（如黏附分子）产生的复杂信号级联反应，这些信号参加了视觉、嗅觉、炎症、先天免疫和适应性免疫、葡萄糖稳态调控、细胞命运决定、细胞分化和细胞转化等过程。，讨论了针对性地干预转导通路来治疗癌症和组装信号复合体的蛋白结构域。《信号转导(原著第2版)(影印版·导读版)》是一本非常有价值的参考书，适合生物化学与分子生物学、细胞生物学等相关专业的高年级本科生、研究生阅读，也进而使MAPKK对MAPK进行苏氨酸、丝氨酸双位点磷酸化[3]。可作为高校相关专业教师的教学和科研参考书，亦可供生物医学、理学、免疫学及相关领域的研究人员参考。

ERK1/2的结构特点及激活机制ERK1/2是由Boulton等[1,2]于90年代初期先后分离鉴定的一种蛋白激酶，相对分子量分别为44kD和42kD,它们有90%的相似性。

想做Erk1/2的信号通路WB，总erk和p-erk有什么区别

(1) GTP 酶分子开关调控蛋白

MAPKKK对MAPKK的丝氨酸、苏氨酸平时ERK位于胞浆内，一旦被激活，ERK迅速穿过核膜，再激活转录因子或/和P70白体S6激酶。双位点磷酸化而将其活化；

Ras/Raf/MEK/ERK细胞信号传递通路是由一个小GTP蛋白连接活化的受体酪氨酸激酶和胞浆蛋白组成的级联反应。

其活化的中心是使Ras进行鸟苷酸交换变成其活化形式Ras2GTP。

PD98059是ERKl/2信号转导途径的，它可以结合ERKl/2并使其失活，阻止Raf对ERKl/2的磷酸化和激活。

只有磷酸这里不要用P38的SB来处理，因为这个是针对P38活性的，抑制的是P38的磷酸化，而不是表达量。化的ERKl/2才具有活性。

由于ERK和通过磷酸化反应可调节某些转录因子的活性，如EIk2l,c2Myc,STATs,Jun,Fos,ATF2和Max等，这些转录因子进一步调节它们各自靶基因的转录，引起特定蛋白的表达或活性改变，最终调节细胞代谢和功能，影响细胞产生特定的生物学效应[4]。

固醇信号转导途径是什么

Ca 2+作为胞内第二信使,在调控细胞对多种信号的应答反应中发挥基本作用, 钙调蛋( calmon , CaM )是细胞质中普遍存ERK1/2为脯氨酸导向的丝氨酸/苏氨酸激酶，可以使脯氨酸相邻的丝氨酸/苏氨酸磷酸化。在的小分子蛋白,有148个氨基酸残基,每个 CaM 分子具有4个 Ca 2+结合位点,它作为行使多种功能的分子开关蛋白介导多种 Ca 的细胞效应, CaM 可通过与 Ca2+的结合或解离而从细胞受到至细胞出现相应的生物学效应，其间通过MAPK信号转导通路多级激酶的级联反应，其中包括3个关键的激酶，即MAPK,MAPKK和MAPKKK。分别处于活化或失活的“开启”或“关闭”状态。形成的 Ca2+-CaM 复合物可结合多种酶及其他靶蛋白,并修饰其活性。

信号通路研究思路

cAMP、cGMP、1,2-二酰甘油(diacylglycerol,DAG)、1,4,5-三磷酸肌醇(inositol 1,4,5-trisphosphate,IP3)、Ca2+（植物中主要的第二信使）。

原文：信号通路研究思路_百度文库

证明一个物能通过抑制P38表达而发挥保护细胞的作用，需要做的是：

首先 ，要证明P38表达增加会导致损伤。

其次，要证明你的物存在保护作用。

再次，证明你的物可以抑制P38表达。

，证明你的物是由于抑制了P38表达而发挥保护作用。

这里需要建立一个损伤模型。正如你提到的，钙离子导致P38mapk的增高，如果某种损伤可以通过钙离子导致P38mapk的增高，那么你就建立起了一个损伤模型。这时，对P38做个RNA干扰，使其表达下降，再来损伤，如果这时损伤不会导致损伤，那么可以说P38mapk的增高会导致损伤。

如果说明的问题是p38磷酸化水平增酶催化下游底物,信号强度放大；本信号通路中涉及多个酶的依次激活,所以可把信号显著放大加而导致损伤，那么我建议用。这时还可以用Dominant-negative。的实验证实该物不影响P38表达，而影响其活化。（应该首先考虑选用，因为目前一些物的作用机制不是抑制靶点的表达，而是抑制靶点的激活。如果在此应用RNAi的话，很可能会漏掉这个机制或增加实验步骤。）

当然就是用你的物先处理一下，再来损伤，如果这时损伤不会导致损伤，那么可以说你的物存在保护作用。

用你的物先处理一下，再来损伤，再检测P38表达，如果用组相对于没有用组P38表达下降，那么可以说你的物可以抑制P38表达。

这一步看似不必要，其实是最重要的步骤，而国内的文章往往忽略了这一关键环节。

这里建议还是用RNA干扰P38表达，再用你的物处理，再进行损伤，如果用组与没有用组的损伤程度一致，那么才可以说你的物是由于抑制了P38表达而发挥保护作用。

也有其局限性，有时是“致命”的，主要原因是缺乏特异性。虽然我们在文章里看到用的时候都说是什么什么的特异性，但真的那么特异吗？其实往往是作者为了写文章发文章的需要而夸大了的特异性。细胞里无数的信号通路，谁也不能保证在作用于靶分子时不会影响其他信号通路。其实无论什么，对剂量的要求都相对比较苛刻，为什么？就是因为一旦浓度高了，就不知道会干扰到其他哪些信号通路，从而产生很多说不清道不明的现象。

PI3K的---LY294002和wortmannin,它们都能抑制PI3K和相关的激酶，但LY294002的浓度达到200μM常用来抑制DNA依赖的蛋白激酶（DNA-PK）；wortmannin在浓度超过3μM常用来抑制运动失调性毛细血管扩张基因突变（ATM)以及DNA-PK。相对而言，MEK1/2的U0126和PD98059以及P38MAPK的SB203580就要好一些。所以研究人员一般应用LY294002时采用20μM，应用wortmannin时采用0.2μM，以此来最小化其他的效应。有些学者们同时应用两种进行对比，也许也有顾及于此的原因吧。

但是，从严谨的角度讲起特异性的话，RNAi也不能说是特异的，我们只能说它是高特异性，因为RNAi的机制中还有很多没有完全阐明。 一些研究者会在RNAi处理后，还要在实验中应用Western来同时检测该蛋白所在家族的其他成员的表达量变化以检测其特异性和选择性，以表严谨 。举个例子：

比如针对Survivin进行RNAi之后，你同时检测XIAP , cIAP1/2等蛋白。当然，如果你所针对基因的siRNA构建已经很成熟，有前人的文章检测特异性做基础，那就另当别论了，所以给科研态度很严谨的lwjssry兄弟提个醒，如果你的siRNA序列尚无很好的文献应用基础，这个问题你也许应该考虑的。

临时找到一个描诉相关内容的06年文献，影响因子3分多，截取其中的内容供参考

信号通路有细胞特异性和条件特异性，即同一信号通路在不同的细胞之间或同一细胞在不同的条件下，作用机理可能是不同的。

做信号传导的在于你研究一种的机制有什么作用，其机制是否于信号传导有关，有哪些关系，是什么原因导致此信号传导的表达，表达后的下游基因怎么变化，这中间有基因敲出或者和激动剂干预后看看上游 下游之间的变化和你预期的结果有没有关系。如果单纯的做信号传导而去做没有什么意义的，就像前面楼上说的一样信号的启动/最终发挥功能！

“想证明哪一个分子是另一分子的充要条件真的很难”。 我最近正在做一个实验，证明A对B的作用。先用外源物处理细胞，跑wetern blot，发现A和B都有所增加，B的量增加在A之后。于是用抑制A，以及用siRNA使A knockdown，然后看B的表达量也下来了。但是这也只能证明A和B有关联，无法证明A对B是直接作用还是间接作用。甚至无法说明B的改变是A信号knockdown造成的，还是A信号knockdown以后，细胞为了弥补该信号的不足，补充促进了C信号，而C信号可以改变B信号。最近在考虑用Co-IP证明A和B有结合作用，也许能证明A和B的直接关系。

探讨信号转导中分子间的充要条件，与探讨数学中的充要条件是不一样的，因为细胞中信号转导通路往往存在反馈机制。即使X是上游信号，Y是下游信号，改变Y信号也会通过反馈机制使得X信号发生改变。所以，在考虑生物体内的信号分子间充要条件时会复杂得多，要慎之又慎下结论。

信号分子的环路效应普遍存在

个人觉得研究A分子与某个信号通路应该更具体得分为两种情况：

1，以前还不知道A分子是这个信号通路的成分，这时我们要证明A分子是这个信号通路的成分，这时的研究就是上文谈到的研究内容了。

2，A分子是信号通路的成分，这是已知的，现在发现某个现象跟这个通路有关，现在我们要证明A分子是这个信号通路参与这个现象的关键分子，则又是另一种模式。1，“创造信号通路”，别人没有研究过A和B 之间的相互作用，而你发现了，并证明了，这就是创造，其实准确点说应该是“发现”，因为信号通路是客观存在的，只不过被找到了而已，不过用“创造”这个词比较形象。这一类的研究是开创性的，比较困难的，研究的时候常常是用免疫共沉淀去把与某个蛋白结合的一堆蛋白都搞出来，再做质谱分析，进行鉴定，再进一步证明两者间的相互作用，这就涉及到充分必要条件的证明。单纯进行这一类的研究缺乏目的性和研究的意义，所以通常还是建立于某种现象基础上的，用自己“创造”的信号通路来解释某种现象，也就是下面说的第二种模式。

2，“利用信号通路”，利用别人或自己“创造”的信号通路来解释某个具体的现象，比如，某个物、某种毒物、某种应激、某种射线、等等，在这些下，具体到某种细胞的某条信号通路发挥调控作用。

在第二类中，是用充分（二） DAG介导的信号通路——蛋白激酶C（PKC）的激活必要条件来证实A现象与B信号通路之间的关系。

看文献是最基础的训练，看文献，一是看思路，二是学技术和逻辑思维。思路告诉我们为什么去做，技术和逻辑思维教我们怎么去做。

过表达A基因，发现B基因的mRNA水平明显增加，对应的B的蛋白水平也明显增加；干扰A基因表达，发现B基因的mRNA水平明显降低，对应的B的蛋白水平也明显降低。投稿，被拒稿，主要原因是审稿人提出：应该弄清楚A是如何调控B的表达的。请问各位老师，A调控B可能是通过什么途径？需要做什么实验？A和B都是脂类代谢中的酶基因，它们在胞浆和核内都有表达。

回答：

2、设A和B是直接关联的（定A影响B的转录），是否一般得做两个实验：Luciferase reporter assay和CHIP assay？只做一个CHIP实验行不行？其中Luciferase reporter assay是否就是为了检验A蛋白是否能结合到B基因的Promoter区？是不是A蛋白必须得是转录因子才有可能结合到B基因的Promoter区？另外，怎么知道A蛋白是不是转录因子呢？

针对这个问题的回答：不过建议找几篇JBC上的文章看看，JBC上这种调调的文章挺多的，精读3-5篇，把它的outline搞清楚，你就胸有成竹了。——我打开JBC网站一看，呵呵，每期专门有Gene Regulation板块。根据JBC上面的文章，A调控B基因，很多都是通过第三者如转录因子实现的。我再翻出以前自己的Real-time PCR实验结果，发现过表达A基因后，转录因子C的mRNA水平显著增加，而干扰A基因表达，转录因子C的mRNA水平显著降低。目前这个现象还没有文献。后期，我准备通过Luciferase reporter assay和CHIP assay来验证转录因子C是否能与B基因作用。我想请教的问题是：A基因调控转录因子C，除了前期的Real-time PCR实验（当然再补一个Western Blot实验），我还需要做其他实验吗？会不会审稿人再提出：你需要弄清楚A基因如何调控转录因子C才行。说简单点：A基因通过转录因子C调控基因B，是否要将A影响C，C影响B两步都弄清楚？——看你的目标杂志了，如果是JBC这样偏机制的，估计会要你说清楚的

3、A可以影响B的mRNA水平，也能影响B的蛋白水平，这样的话，可能是只通过影响B的RNA水平影响B的蛋白表达，也可能同时影响B的RNA水平和B的蛋白稳定性。B的蛋白稳定性你可以通过加入CHX检测B的半衰期。另外就是你说的Luciferase reporter assay实验。

4、A和B的变化总是一致的，应该很有可能是通过转录水平调控的，因为你的mRNA、蛋白都变了。既然是转录水平，那就要找到B的启动子的序列，对应和这个序列结合的蛋白，这个蛋白可能是A也可能是其他的间接的。

作者： （英）维拉斯（Willars，G.B.），（英）查理斯（Challiss，R.A.J）原著，

张幼怡主译

出 版 社： 大学医学出版社

出版时间： 2008-3-1

这本书全面反映了G蛋白偶联受体(GPCR)及其信号转导领域中的研究现状和成就，详细介绍了受体及其信号转导研究的技术、方法及原理。内容涉及受体与配体的结合、受体抗体的制备、受体与G蛋白的相互作用和激动、受体表达和、受体内化和翻译后修饰、GPCR与蛋白质相互作用以及如何利用敲除和敲人策略研究受体生理与理功能等新技术、新策略。

可以通过对受体 加抗体处理 或者 RNAi/过表达 等方式，调节受体表达量，然后用 基因芯片技术 研究下游通路各基因的表达情况。

在上述方法做完后，可以用受体的好用的抗体，做个免疫共沉淀(CoIP)，将所有和它相互作用的蛋白抓下来，直接煮珠子(protein A-argrose-beads)，做SDS-PAGE，用IgG做对照，然后打质谱，鉴定出异蛋白，当然这只是补充试验，胶图上分子量大的可能是下游蛋白，而分子量小的可能是上下游信号蛋白。

JAK2是什么

1、下一步应该搞清楚B基因mRNA改变的原因是什么，在转录水平还是影响了RNA的稳定性。

JAK2是非受体型酪氨酸蛋白激酶（Janus激酶）家族的一种。

Janus激酶有4个家族成员，分别是JAK1、JAK2、TYK2和JAK3。

JAK1、JAK2和Y要证明你的物是通过抑制P38表达而发挥保护作用，K2广泛存在于各种组织和细胞中，而JAK3仅存在于骨髓和淋巴系统。

扩展资含氮激素作用于靶细胞,与膜上的相应受体结合,从而激活膜上的腺苷 酸环化酶,促进胞浆内三磷酸腺苷(ATP)转变为环-磷酸腺苷(cAMP) ,cAMP激活依赖cAMP的蛋白激酶,通过催化细胞内蛋白质的磷酸化作用,诱发靶细胞的各种生理效应。含氮激素主要是通过G蛋白耦联受体和酶耦联受体介导的方式发挥作用:G蛋白耦联受体途径根据G蛋白激活的效应器酶和生成的第二信使的不同,主要通过下面途径进行信号转导:①AC-cAMP-PKA 途径; ②PLC-IP3/DG-CaM/PKC 途径;③GC-cGMP-PKG 途径。料：

JAK可选择性抑制 JAK 激酶，阻断 JAK/STAT 信号通路。临床上JAK主要用于筛选血液系统疾病、肿瘤、类风湿性关节炎及银屑病等治疗物。

JAK信号涉及细胞因子受体对STATs(信号转导物和转炉激活的补充，激活和随后STATs至细胞核导致基因表达的调控。

骨髓纤维化(MF)是一种骨髓增生性肿瘤(MPN)已知与JAK1和JAK2信号失调有关联。

在一个的JAK2V617F-阳性MPN小鼠模型中，口服给予ruxolitinib预防脾肿大，脾中JAK2V617F突变细胞优先减少和减低循环炎症细胞因子(如，TNF-α，IL-6)。

参考资料来源：

JAK2是酪氨酸激酶中的Janus家族的一员，JAK-STAT信号通路是近年发现的一条由细胞因子的信号转导通路，参与细胞的增殖、分化、凋亡以及免疫调节等许多重要的生物学过程。参与该信号通路的细胞因子的受体缺乏固有的激酶活性，它们经常组成性地与JAK联系。细胞因子诱导受体的聚合

反应,从而使JAKs相互靠近并引起交互的磷酸化而致活化,活化的JAKs能磷酸化细胞因子受体胞浆结构域中的酪氨酸残基,而募集含SH2结构域的信号分子,如信号转导和转录活化因子(Signal transducer and activator of transcription,STAT)等。STAT蛋白通过其SH2结构域与酪氨酸-磷酸化细胞因子受体结合,并通过JAKs使其特殊的C端酪氨酸残基磷酸化。磷酸化的STATs从受体上解离,并借其SH2结构域形成同源或异二聚体,随后进入核内,在核内它们与靶基因的启动子异的DNA序列结合,并因而调节转录。许多细胞因子和生长因子通过JAK-STAT信号通路来传导信号，这包括白介素2-7（IL-2-7）、生长激素（GH）、表皮生长因子(EGF)、血小板衍生因子(PDGF)以及干扰素(IFN)等等。

你好，看到你回答的 细胞对信号是如何整合与调控的？

IP3 内质网膜上的IP3受体（离子通道型受体的环核苷酸受体亚类） 打开Ca++通道，Ca++由内质网进入胞浆，该胞内钙库释放的Ca++介导了钙动员的最初反应，随后会引起长时间的外钙内流，使胞内钙浓度升高， Ca++进一步激活Ca++/CAM依赖性蛋白激酶，使特异的蛋白质磷酸化，引起细胞效应。

不同的信号分子细胞的反应不同，同一信号分子作用于不同的细胞产生的效应也不同。这与信号分子与细胞表面受体结合后引起细胞反应有关。外界信号（如光、电、化学分子）作用于细胞表面受体，引起胞内信使的浓度变化，进而导致细胞应答反应的一系列过程。脂溶性信号分子通过基因表达途径引起细胞效应（如类固醇激素等脂溶性激素的受体。核受体的本质是一些转录调节因子，其一级结构具有很高的同源性，并具有相同的功能域，即N末端区（A/B区）、DNA结合区（C区）、连接区（D区）和激素结合区（E区，位于C末端） 信号转导过程：激素与受体E区结合，核受体被激活，其DNA结合区与靶基因的激素反应元件结合，继而与靶基因的转录因子相互作用，调节靶基因的表达，引起生物学效应。），水溶性信号分子通过第二信使途径引起细胞反应，第二信使途径相关信号转导通路有：AC偶联通路、cGMP磷酸二酯酶偶联通路、磷脂酶C偶联通路、磷脂酶A2偶联通路以及对离子通道直接或间接的调节等。

ERKl/2是Ras通路中重要的信号分子，位于Ras的下游，主要由生长因子受体（或蛋白质酪氨酸激酶受体）介导激活，并需要Ras,PKC和Raf蛋白参与。

AC偶联通路又称cAMP系统、PKA系统， cAMP是目前研究最广泛、最深入的第二信使。胞外信息与受体结合后，通过调节胞内cAMP的浓度，将细胞外信号转变为细胞内信号。cAMP信号途径可表示为：

在类中，是用充分必要条件来证实A分子与B分子的作用。

激素→ G蛋白耦联受体→G蛋白→腺苷酸环化酶→cAMP→依赖cAMP的蛋白激酶A（PKA）→

①直接作用于底物蛋白，使底物蛋白的丝氨酸和苏氨酸磷酸化，底物蛋白构象变化，从而调节酶活性、通道开闭和受体的反应性等。

②进入细胞核，使基因调控蛋白磷酸化→基因转录。

该通路主要由5部分组成：

目前已发现7种磷酸二酯酶PDE，除V型和VI型是cGMP特异性的外，其余5中均为cAMP特异性的。

环鸟苷酸信使系统 又称cGMP系统：

胞内cGMP水平较cAMP低得多。鸟苷酸环化酶GC催化GTP形成cGMP，GC有2大类①胞浆可溶性GC，由NO激活，NO-cGMP信号通路是NO发挥众多生理作用的主要机制；②膜结合型GC，为跨膜受体，属于受体中的与酶相关的单跨膜受体亚类，如心钠素ANP受体，其胞外区与心钠素ANP结合，胞内区具有鸟苷酸环化酶GC活性。（当心房内压力升高时，心房肌合成心钠素，作用于心钠素受体，在心血管内环境稳定中起重要作用。）

鸟苷酸环化酶→cGMP→依赖cGMP的蛋白激酶G（PKG）→细胞效应

胞外信号分子与细胞表面G蛋白耦联受体结合，激活质膜上的磷脂酶C（PLC-β），使质膜上4，5-二磷酸磷脂酰肌醇（PIP2）水解成两个第二信使IP3（1，4，5-三磷酸肌醇）和DAG（二酰基甘油）。

（一） IP3 介导的信号通路——胞内Ca++动员

DAG可激活蛋白激酶C（PKC）， PKC进一步磷酸化下游蛋白而发挥生理效应。

PKC为单体酶，由一条肽链构成。其调节区具有DAG、磷脂和Ca++结合部位，目前至少发现10种PKC亚型，多数PKC的激活需要DAG和Ca++ 的协同作用，因此IP3/Ca++和DAG/PKC两个反应系统共同调节PKC的活性。PKC能使底物蛋白的Ser-OH 和Thr-OH残基磷酸化，许多被PKC磷酸化的蛋白都是膜蛋白，如胰岛素受体、离子通道等。

磷脂酶A2偶联通路：信号通路：受体- G蛋白（Go）- PLA2- AA-前列腺素&血栓素（环氧合酶）和白三烯等（脂氧合酶）。

①受体（α1-受体、缓激肽受体等）和配体结合后激活Go蛋白， 活化的Go激活 PLA2；②任何能使胞内Ca++浓度升高的递质都能增强PLA2通路

JAK2是什么

transcription,STAT)等。STAT蛋白通过其SH2结构域与酪氨酸-磷酸化细胞因子受体结合,并通过JAKs使其特殊的C端酪氨酸残基磷酸化。磷酸化的STATs从受体上解离,并借其SH2结构域形成同源或异二聚体,随后进入核内,在核内它们与靶基因的启动子异的DNA序列结合,并因而调节转录。许多细胞因子和生长因子通过JAK-STAT信号通路来传导信号，这包括白介素2-7（IL-2-7）、生长激素（GH）、表皮生长因子(EGF)、血小板衍生因子(PDGF)以及干扰素(IFN)等等。

JAK2是酪氨酸激酶中的Janus家族的一员，JAK-STAT信号通路是近年发现的一条由细胞因子的信号转导通路，参与细胞的增殖、分化、凋亡以及免疫调节等许多重要的生物学过程。参与该信号通路的细胞因子的受体缺乏固有的激酶活性，它们经常组成性地与JAK联系。细胞因子诱导受体的聚合

是G蛋白偶联受体的信号转导通路中的一种途径，在磷脂酰肌醇信号通路中胞外信号分子与细胞表面G蛋白耦联型受体结合，激活质膜上的磷脂酶C（PLC-β），使质膜上4，5-二磷酸磷脂酰肌醇（PIP2）水解成1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）和二酰基甘油（DG）两个第二信使，胞外信号转换为胞内信号（图8-21），这一信号系统又称为“双信使系统”（double messenger ）。

反应,从而使JAKs相互靠近并引起交互的磷酸化而致活化,活化的JAKs能磷酸化细胞因子受体胞浆结构域中的酪氨酸残基,而募集含SH2结构域的信号分子,如信号转导和转录活化因子(Signal

transdu将两种因子A和B分别做基因沉默，沉默A gene 看看A和B表达的情况，然后沉默B gene 再看看A和B表达的情况。上游的因子被沉默表达后，下游的因子肯定表达下调或不表达。而下游因子被沉默表达后，上游因子的表达不会受影响。还可以做个免疫共沉淀，看看上游因子是不是直接结合（作用）于下游因子的基因启动子区，开启下游表达。如若不是，可能另有其他的环节在中间过程。cer

and

activator

第二信使有哪些物质,它们各在何种信号转导通路中发挥作用

①激ERK1/2的活化是将信号从细胞膜表面受体转导至核的关键，这一转导过程有GTPase2Ras,Raf21,丝/苏氨酸激酶和MEK双特异性激cGMP信号途径可表示为：酶等上游元素参与；活型受体（Rs）或抑制型受体（Ri）；

细胞内有五种重要的第二信使:

具体功能太复杂，自己看文献吧。

磷脂酰肌醇信号通路是什么？

《受体信号转导研究方法（第2版） 》

IP3与内质网上的IP3配体门钙通道结合，开启钙通道，使胞内Ca2+浓度升高。激活各类依赖钙离子的蛋白。用Ca2+载体离子霉素（ionomycin）处理细胞会产生类似的结果（图8-22）。

of

DG结合于质膜上，可活化与质膜结合的蛋白激酶C（Protein Kinase C，PKC）。PKC以非活性形式分布于细胞溶质中，当细胞接受，产生IP3，使Ca2+浓度升高，PKC便转位到质膜内表面，被DG活化（图8-22），PKC可以使蛋白质的丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化是不同的细胞产生不同的反应，如细胞分泌、肌肉收缩、细胞增殖和分化等。DG的作用可用佛波醇酯（phorbol ester）模拟。

Ca2+活化各种Ca2+结合蛋白引起细胞反应，钙调素（calmon，CaM）由单一肽链构成，具有四个钙离子结合部位。结合钙离子发生构象改变，可激活钙调素依赖性激酶（CaM-Kinase）。细胞对Ca2+的反应取决于细胞内钙结合蛋白和钙调素依赖性激酶的种类。如：在哺乳类脑神经元突触处钙调素依赖性激酶Ⅱ十分丰富，与记忆形成有关。该蛋白发生点突变的小鼠表现出明显的记忆无能。

IP3信号的终止是通过去磷酸化形成IP2，或被磷酸化形成IP4。Ca2+由质膜上的Ca2+泵和Na+-Ca2+交换器将抽出细胞，或由内质网膜上的钙泵抽进内质网

DG通过两种途径终止其信使作用：一是被DG-激酶磷酸化成为磷脂酸，进入磷脂酰肌醇循环；二是被DG酯酶水解成单酯酰甘油。由于DG代谢周期很短，不可能长期维持PKC活性，而细胞增殖或分化行为的变化又要求PKC长期活性所产生的效应。现发现另一种DG生成途径，即由磷脂酶催化质膜上的磷脂酰胆碱断裂产生的DG，用来维持PKC的长期效应。

首先由激活的SrcPrK和ZAP-70通过LAT使膜结合的磷脂酶C(PLC)分子丁链上的酪氨酸残基发生磷酸化。磷酸化的PLC—γ发挥酶活性，使底物二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)水解成两个成分：三磷酸肌醇(1P3)和二酰甘油(DAG)。IP3可迅速地从膜内侧向胞质溶胶中扩散，一方面打开细胞膜上的钙通道使Ca2+进入细胞内，同时开启细胞内钙池(内质网)增加Ca2+—的释放，协同提高胞内游离钙的浓度。胞质Ca2+含量的上升，激活一种称为钙调蛋白(camon)的Ca2+结合蛋白，后者可调节其他酶类的活性，并最终导致钙调磷酸酶的激活。

T细胞抗原激活信号转导磷脂酰肌醇途径的启动

钙调磷酸酶是一种丝、苏氨酸磷酸酶而不是PTK。另一方面，与胞膜内侧相联的DAG则直接激活PKC。后面熔会捍到，钙调磷酸酶和PKC主要分别活化两种重要的转录因子NF—AT和NF—cB。因而在这一条信号转导的下游通路中，实际上再一分为二，形成钙调磷酸酶参与的途径。和PKC介导的途径。由于一个PLCγ分子可以产生很多的IP2和DAG，这就放大了传人的抗原识别信号．并保证其转导的有效性。