流式细胞术细胞周期 流式细胞术细胞周期结果分析
流式细胞术简称FCM,是利用流式细胞仪对特定的细胞群加以分选的多参数计量技术.下图甲为细胞周期过程中
(1)图甲中对细胞进行放射性同位素标记,研究DNA含量变化,应选择标记胸腺嘧啶(或T).
流式细胞术细胞周期 流式细胞术细胞周期结果分析
流式细胞术细胞周期 流式细胞术细胞周期结果分析
(2)据图甲分析,AB段DNA含量为2N,表示G1期,BC段DNA含量为2N→4N,表示S期,CA段DNA含量为4N,表示分裂期,则一个完整的细胞周期的表示方法 A→A,其中代表S期的是BC段,加入试剂抑制DNA的,则相关细胞都会停留在S时期.
(3)分析图乙,部分细胞中DNA含量少于2N,说明油漆中的有害成分导致细胞内DNA受到破坏降解,部分细胞DNA含量偏低.
(4)分析图乙,细胞中DNA含量为N、2N和4N,则说明该细胞群可能来自于(器官),因为精原细胞能进行有丝分裂和减数分裂.
故为:
(1)胸腺嘧啶(或T)
(2)A→ABC段S(BC)
(3)油漆中的有害成分导致细胞内DNA受到破坏降解,部分细胞DNA含量偏低
(4)(性腺不得分)
流式细胞术测细胞周期S期增多是什么意思
细胞周期分为G1,也就是一般的细胞静止期,细胞要分裂,就要DNA,好一倍的DNA后,正要分列前,含有2倍的DNA,叫做G2期。而在G1和G2之间,是DNA合成的时间,叫做S期,S是英语synthesize(合成)个字母的大写。
这个期增多,表示细胞分裂活跃。
请教流式细胞术PI染色进行细胞周期分析的原理
实验原理:流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。
细胞内的DNA含量随细胞周期进程发生周期性变化,如G0/G1期的DNA含量为2C,而G2期的DNA含量是4C。利用PI标记的方法,通过流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定,可分析细胞周期各时相的百分比。
细胞周期的流式细胞术为什么要用到rna酶
这是因为做细胞周期的时候要用荧光染料染DNA,一次判断细胞DNA的相对含量。这些荧光染料,比如PI,可以染,无法特异性的分别DNA和RNA。只有用RNA酶消化掉RNA后,才能消除RNA的干扰。不然DNA和RNA都会被染色。
流式周期需要空白组吗
需要。流式细胞术用于细胞周期的分析通常需要一个未经染色的空白对照组。这个空白对照组通常使用未经染料处理的细胞样品,以消除自然荧光、背景噪音等因素对实验结果的影响。同时,空白对照组还可以用于确定DNA峰位置、区分细胞核的G0/G1阶段、G2/M阶段和S阶段,从而更加准确地确定细胞周期。通过对比空白对照组和染色组之间的异,可以有效消除误,提高实验结果的准确性和可靠性。
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