hepes缓冲液 hepes缓冲液可以高温灭菌么

请问哪位高人知道pH为7左右的缓冲溶液？

3.1×PBS缓冲液的配制方法为：将10xPBS缓冲液用纯净水稀释至1倍即可。

3、醋酸铵缓冲溶液：67-7.0

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三、PBS缓冲液的储存及使用

人体血液的缓冲系统就是近似7，是碳酸与碳酸氢钠，

一般缓冲溶液的PH = P Ka

6.98 6.95 6.92 6.90 6.88 6.86 6.85 6.84 6.84

不同温度时的pH值(pH in different temperatures)

KRBB配置后如何灭菌？是高压灭菌还是过滤除菌？

DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。

KRBB液的配方是：NaCl

118.5mmol/L,

CaCl2

2.54mmol/L,

1.19mmol/L,

NaHCO325mmol/L,

MgSO4

1.19mmol/L,

HBSAEPES

10mmol/L,

1%)。

而10mmol/L

HEPES缓冲液配制方法如下：准确称取HEPES

2.383g，加入新鲜三蒸水定容至1L。过滤除菌，分装后4℃保存。

BSA是牛血清白蛋白，也是需要过滤除菌的。

所以，你可以将能灭菌的盐类先高压灭菌，不能灭菌的后两样溶液过滤除菌，然后在混匀使用。

或者干脆直接全部都过滤除菌，不过这样的话工作量就大了。

HEPES-NaOH缓冲液 是怎么配出来，麻烦各位了啊，比较急用，拜托了

1.由于PBS缓冲液是由和盐水组成，因此也可以用其它缓冲液代替，例如Tris-buffered saline(TBS)和HEPES-buffer saline(HBS)等。

称取一定质量的HEPES（根据你需要的浓度计算），溶于蒸馏水中，然后用浓的NaOH溶液（如1M）调至所需pH值。

分别称取在(115.0±5.0)℃干燥2～3h的磷酸氢二钠（Na2HPO4）(3．53±0．01)g和磷酸二氢钾（KH2PO4） (3．39±0．01)g，溶于预先煮沸过15～30min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml（注：可用于酸度计校准） 不同温度时的pH值(pH in different temperatures)

HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。

hepes的浓度对体系有何影响

KH2PO42、标准缓冲溶液：10℃，pH6.92

在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。那么，HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。

HEPES分子量为238.31，化学名：4-哌嗪乙磺酸，分子式: C8H18N2O4S。

NHS酯交联的机理是什么？

一般细胞不要使用，因为该溶液中含有钙离子，会促进细胞聚团，还有乙酰水杨酸。

NHS 酯反应化学

NHS 酯是通过羧酸盐分子的碳二亚胺活化形成的反应基团（参阅碳二亚胺交联剂化学）。NHS 酯活化的交联剂和标记化合物在生理至弱碱性条件下（pH 7.2 至 9）与伯胺反应，形成稳定的酰胺键。反应释放出 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）

NHS-酯交联反应最常在室温或 4°C 下于 pH 7.2-8.5 的、碳酸盐-碳酸氢盐、HEPES 或硼酸盐缓冲液中进行（0.5-4 小时）。与伯胺缓冲液（例如 Tris，TBS）不相容，因为它们会发生竞争反应。但是，在某些步骤NHS 酯水解与伯胺反应产生竞争。水解速率随缓冲液 pH 值的增加而增加，低浓度蛋白质溶液中的交联效率降低。在 pH 7.0 和 0°C 下，NHS-酯化合物的水解半衰期为 4 至 5 小时。在 pH 8.6 和 4°C 下，该半衰期降低至 10 分钟。在不含伯胺的水溶液中，NHS 酯水解的程度可以在 260 至 280 nm 处测量，因为 NHS 副产物在该范围内吸收峰。中，结合步骤结束时可添加 Tris 或甘氨酸缓冲液以淬灭（停止）反应。

低浓度（≤3 mM 或 0.02％）或硫柳汞（≤0.02 mM 或 0.01％）通常不会明显干扰 NHS-酯反应，但浓度较高时会产生干扰。不纯的甘油和高浓度甘油（20-50％）也会降低反应效率。

“dmem”和“dmem/f12”有什么区别？

HEPES缓冲剂能较长时间控制恒定的pH范围，低浓度的HEPES对细胞无毒性作用，常用于细胞培养，比如各种细菌、真菌的培养液或保存液中可以通过添加HEPES来维持细胞、细菌、所需的pH环境。

DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养，适用于生长速度快、附着性较的肿瘤细胞培养。 DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。

DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/rna提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，即称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium）。

Tris-HCl 缓冲液与HEPES缓冲液区别打吗

0℃ 5℃ 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 30℃ 35℃ 40℃

我做肿瘤细胞脂筏提取要用Modified HEPES buffer: 25mMHEPES-HCl, pH6.5, 150mMNaCl, 1mMEDTA, 1mMPMSF, protease inhibito单独的HEPES可以，但是也没有必要，比PBS贵。r cocktail.可是看到的是Tris-HCl 缓冲液，用他们陪细胞裂解液有区别吗？或者说可以换吗？

求教：Hepes缓冲液和PBS的区别

Tris-HCl 缓冲液：Western及IP细胞裂解液的主要成分为20mM Tris(pH7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，以及sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，EDTA，Na3VO4，leupeptin等多种。可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。

特点那些理论的，你看下《分子克隆》吧

我就跟你说下具体的吧

我们一般配p一般HEPES缓冲液都会加NaCl 和Na2HPO4.7H2O 然后用NaOH 调节PH值的。h

而hepes我们一般用在配置培养液的时候，用hepes把培养液的ph调至你需要的数值，hepes的作用就是保持培养液的ph在一定的范围内不变

不与钙反应的缓冲液

7.4的pbs，不管是什么细胞，如果你做细胞换液、传代、冻存等等，都要移除旧的培养液后，用pbs清洗培养皿

1、硼酸盐缓冲液

3、Tris-HCl缓冲液6.83 6.83 6.83 6.84 6.85 6.86 6.88 6.89 -

Ca单质是活泼金属，只要含水的液体都能与他发生反应。如果是含Ca的化合物，缓冲液一般会采用这种化合物的饱和溶液。

早忘记了化学

培养液加入hepes后还要调节ph值吗

2、HESulfo(磺基)-NHS 酯除了在 N-羟基琥珀酰亚胺环上含有磺酸根（–SO3）外，其他部分与 NHS 酯相同。该带电基团对整个化学反应没有影响，主要用于增加含有它们的交联剂的水溶性。此外，带电基团可防止Sulfo-NHS 交联剂穿过细胞膜，使它们可用于细胞表面交联。PES缓冲液

HEPES量238.31化名：4-哌嗪乙磺酸式: C8H18N2O4S

HEPES用于物缓冲剂pH值缓冲范围：6.8-8.2用化诊断试剂盒、DNA/rna提取试剂盒及PCR诊断试剂盒细胞毒性作用种氢离缓冲剂能较间控制恒定pH范围使用终浓度10-50mmol/L