为什么革兰染色后会形成两种不同的颜色?其机制是什么?三个学说?

革兰氏因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。染色的异主要是阴性与阳性细菌细胞壁的异所引起的。染色主要是染的细菌的细胞壁。

原理 通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

结晶紫染色原理 结晶紫染色剂配方结晶紫染色原理 结晶紫染色剂配方


结晶紫染色原理 结晶紫染色剂配方


2．哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？

因为,结晶紫染色是不会区分出细胞核和细胞质的.苏木精染细胞核成紫色,易红染细胞质成粉色.这些是原理.细胞形态不清晰原因：没固定好,细胞破碎.改4%的中性试试.2,染色时间长,改为10-15min.3,没清洗干净,多洗几遍,4,最重要的：结晶紫染色本身就不清晰,就是为了计算细胞数目,方便才这样.要是为了观察结构,就不要用结晶紫了

脱色环节脱色不足会把革兰氏阳性菌染3）自来水冲洗。成阴性菌，脱色过度会把阴性菌染成阳性菌。染色时间染色时间过长或过短都会影响染色结果的正确性。

影响革兰氏染色结果正确性的关键环节是用脱色剂乙醇处理，为了保证革兰氏染色结果的正确性，必须控制乙醇脱色时间，尽量采用规范的染色方法。

扩展资料：

原理：

因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出；

脱色环节脱色不足会把革兰氏阳性菌染成阴性菌，脱色过度会把阴性菌染成阳性菌。染色时间染色时间过长或过短都会影响染色结果的正确性

甲醛固定后的细胞活性用结晶紫怎么检测

革兰氏染色原理：

有人用异色反应。甲紫溶液染色染色体原理是蛋白样物质中的酸性黏多糖与甲紫起异色反应。甲紫溶液是一种消毒防腐剂，有消毒、防腐、收敛、杀菌。用于治疗皮肤、黏膜的化脓性感染、白色念珠菌引起的口腔炎及烫伤、烧伤等。结晶紫染色法测定细胞增殖活性的吗

甲紫溶液染色染色体原理

常用的细胞染色方法有：3、瑞氏染色法，瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成；

根据细胞壁成份不同，简要说明革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的染色原理

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体作方法是：

原理 通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。于水的结晶紫与碘的复合物。

革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；

真核原核细胞被染革兰氏碘液色的主要物质是什么

“革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。初染得染色液通常为革兰氏染色法，是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法，属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌，由于其与周围环境折光率别甚小，故在显微镜下极难区别。经染色后，阳性菌呈紫色，阴性菌呈红色，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而用以分类鉴定。染色原理：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，再用95%乙醇脱色。结晶紫，媒染通常为碘液，复染的染色液通常为蕃红或者沙黄。"

其实没有通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙；任何物质被染色，只是染色液被卡在细胞壁里。革兰氏染色是针对原核细胞的，原核细胞通常都具有细胞壁，但是有薄和厚的区分，薄的被革兰氏染色后呈现红色，称之为革兰氏阴性，厚的被染色成紫色，称之为革兰氏阳性。

根据原理可知，从微观上讲，染色液利用细胞壁的通透性进入细胞壁内，使之呈现不同的颜色，但是染色液并没有与细胞壁结合，只是被卡在细胞壁内。

如何理解革兰氏染色的机制？

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。

细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。

G＋菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。

1）涂片固定。

4）加碘液扩展资料覆盖涂面染1分钟。

5）水洗，用吸水纸吸去水分。

6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。

7）蕃红染色液（稀）（或沙黄）染10秒钟后，自来水冲洗。干燥，镜检。

染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。

瑞氏吉姆萨染色原理

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多别，染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料，易脱色，这是染色反应的主要依据。 另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。所以染色时的条件要严格控制。例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。所以脱色时间，脱色方法也应严格控制。

染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。

所以细胞染色对氢离子浓度十分敏感，染色用正经片一定清洁，要无酸碱污染。配制顼特液一定用优质甲醇，稀释染色一定用缓冲液，冲洗一定用水应近中性，不然可导致各种细胞染色反应异常，以致于识别困难，甚至造成错误的。

1、简单染色法，常用碱性染料如美蓝等进行简单染色；

2、革兰氏染色法，主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脱色以及番红复染四个过程；

4、吉姆萨染色法，吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同；

5、细胞免疫荧光染色法，免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。

染色细胞固定有物理法与化学法，物理参考资料来源：法为干燥和火焰固定，化学法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。

1、偶氮偶联法：利用人工合成的酶底物，在酶作用下，产生分解产物，再与重氮盐结合引起偶氮偶联，使其形成不溶性的偶氮色素，以此证明酶的存在。

2、法：粒细胞和单核细胞中的物酶作用于氢，释放新生态氧，使无色的形成蓝色沉淀。

3、普鲁士蓝法：细胞内、外铁与酸性亚铁作用，形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。

什么是革兰氏染色法

具体原理是：初染，染色液进入细胞壁。媒染，碘液与结晶紫结合成络合物卡在细胞壁内。脱色，95%的乙醇能够脱掉细胞壁内的脂类物质，由于厚的细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，络合物出不来，而薄的肽聚糖比较疏松，类脂含量高，经过脱色，孔径变大通透性增强，络合物渗出。复染，复染染色液颜色较浅，所以厚的细胞壁因为含有深颜色络合物覆盖了复染的染色液颜色，呈现络合物的紫色，而薄的只呈现复染的红色。

您好。

希望能够帮2）草酸铵结晶紫染1分钟。到您，谢谢，望采纳。

革兰染色时忘记使用结晶紫会有什么样的后果

PH对细胞染色有一些影响。细胞里各种成分均不蛋白质，因为蛋白质系两性电解质，带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境里正电荷增多，易和伊红结合，染色为偏红；在偏碱性环境里负电荷增多，易和美蓝或天青结合，染色偏蓝。

会出现头屑剥离的现象。

Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

忘记使用结晶紫会出现头屑剥离的现象。革兰氏染色的原理是：当用结晶紫初染后，像简单染色法一样，所有细菌都被染成初染剂的紫色，碘作为媒染剂，它能与结晶紫结合成一种结晶紫，碘的复合物，这种复合物增强了染料与细菌的结合能力，当用脱色剂脱色时，不至于很轻易就把紫色脱去。