mes缓冲液_MES缓冲液中文名
农杆菌诱导培养基中Mes是什么剂
你好!DNA应用甲基绿溶液染色。一般关察DNA,RNA计算MES用量至终浓度 30mmol/L;的分布用甲基绿和吡不太了解,化学没学好罗红混合染色。0.05mol/L MES-TRIS缓冲液PH=8.2的配置方法
(1)PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供双价阳离子。注:PBS不是磷酸缓冲液(phosphate buffer solution,PB)。(2) TRIS:三羟(羟甲基)你好,硅胶中含有大量的二氧化硅,是一种十分稳定的物质,除强碱、外不与任何物质发生反应,不溶于水和任何溶剂,无毒无味,化学性质稳定,自然环境下的使用寿命可达几十年(No.T-1503,Sigma Chemical Co.或等效的)。
mes缓冲液_MES缓冲液中文名
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硅胶土能够灰化嘛?在做膳食纤维的 测定,其中灰分的测定中如何排除硅
Chemical酶-重量法1.原理:样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。总膳食纤维(TDF)是先酶解,然后用乙醇沉淀,再将沉淀物过滤,将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗,干燥称重。不溶性和可溶性膳食纤维(IDF和SDF)是酶解后将IDF过滤,过滤后的残渣用热水冲洗,经干燥后称重。SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀,然后再过滤,干燥,称重。TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。2.适用范围AOAC9.43本方法适用于各类植物性食物和保健食品。3.仪器3.1烧杯:400或600ml高脚型。3.2过滤用坩埚:玻料滤板,美国试验和材料学会(ASTM)40-60μm,Pyrex60ml(CorningNo.36060buchner,或同等的)。如下处理:(1)在灰化炉525℃灰化过夜。炉温降至130℃以下取出坩埚。(2)用真空装置移出硅藻土和灰质。(3)室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。(4)用水和去离子水冲洗坩埚;然后用15ml丙酮冲洗然后风干。(5)在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土,在130℃烘干恒重。(6)在干燥器中冷却1小时,记录坩埚加硅藻土重量,至0.1mg。3.3真空装置:(1)真空泵或抽气机作为控制装置。(2)1L的厚壁抽滤瓶。(3)与抽滤瓶相配套的橡皮圈。3.4振荡水浴箱:(1)自动控温使温度能保持在98±2℃。(2)恒温控制在60℃。3.5天平:分析级,至±0.1mg。3.6马福炉:温度控制在525±5℃。3.7干燥箱:温度控制在105和130±3℃。3.8干燥器:用二氧化硅或同等的干燥剂。干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。3.9PH计:注意温控,用pH4.0、7.0和10.0缓冲液标化。3.10移液管及套头:容量100μl和5ml。3.11分配器或量筒:(1)15±0.5ml,供分配78%的乙醇,95%的乙醇以及丙酮。(2)40±0.5ml,供分配缓冲液。3.12.磁力搅拌器和搅拌棒。4.试剂全过程使用去离子水,试剂不加说明均为分析纯试剂4.1乙醇溶液:(1)85%:加895ml95%乙醇在1L量筒中,用水稀释至刻度。(2)78%:加821ml95%乙醇在1L量筒中,用水稀释至刻度。4.2丙酮:4.3供分析用酶:在0-5℃下储存。(1)热稳定α-淀粉酶溶液:Cat.No.A3306,SigmaChemicalCo.,St.Louis,MO63178,或Termamyl300L,Cat.No.361-6282,Novo-Nordisk,Bagsvaerd,Denmark,或等效的酶。(2)蛋白酶:Cat.No.P30,SigmaChemicalCo.,或等效的。当天用MES/TRIS缓冲液中现配50mg/ml酶溶液。(3)淀粉葡糖苷酶溶液:Cat.No.AMGA93,SigmaChemicalCo.,或等效的。4.4硅藻土:酸洗(Celite545AW,No.C8656,SigmaChemicalCo.,或等效的)。4.5洗涤液:两者挑一。(1)铬酸:120gNa2Cr2O7·2H2O,1000ml蒸馏水和1600ml浓硫酸。(2)实验室用液体清洁剂,预备急需清洗的(Micro,InternationaMES-TRIS缓冲液:0.05mol/L,温度在24℃时pH值为8.2.(1) MES:2-(N-吗啉代)磺酸基乙烷(No.M-8,Sigma Chemical Co.或等效的).(2) TRIS:三羟(羟甲基)(No.T-1503,Sigma Chemical Co.或等效的)....lProductsCorp.,Trenton,NJ08016,或等效的)。用水配制2%溶液。4.6MES-TRIS缓冲液:0.05mol/L,温度在24℃时pH值为8.2。(1)MES:2-(N-吗啉代)磺酸基乙烷(No.M-8,SigmaChemicalCo.或等效的)。(2)TRIS:三羟(羟甲基)(No.T-1503,SigmaChemicalCo.或等效的)。在1.7L的蒸馏水中溶解19.52gMES和12.2gTRIS,用6mol/LNaOH调pH到8.2,用水定容至2L。(注意:24℃时的pH为8.2,但是,如果缓冲液温度在20℃,pH就为8.3,如果温度在28℃,pH为8.1。为了使温度在20-28℃之间,需根据温度调整pH值。)4.7盐酸溶液:0.561mol//L,加93.5ml6mol/L盐酸到700ml水中,用水定容至1L。5.作方法5.1.样品制备:(1)固体样品:如果样品粒度>0.5mm,研磨后过0.3-0.5mm(40-60目)筛。(2)高脂肪样品:如果脂肪含量>10%,用去脂。每克样品用25ml,每次提取完静置一会儿再小心将烧杯倾斜,慢慢将倒出,共洗三次。(3)高碳水化合物样品:如果样品干重含糖>50%,用85%乙醇去除糖份,每克样品每次10ml,共洗三次轻轻倒出,然后在40℃烘箱中不时翻搅干燥过夜,并研磨过0.5mm筛。5.2.样品消化(1)准确称取双份1.000±0.005g样品(M1和M2),置于高脚烧杯中。(2)在每个烧杯中加入40mlMES-TRIS缓冲液,在磁力搅拌器上搅拌直到样品完全分散。(防止团块形成,使受试物与酶能充分接触)。(3)用热稳定的淀粉酶进行酶解处理:加100μl热稳定的淀粉酶溶液,低速搅拌。用铝箔片将烧杯盖住,在95-100℃水浴中反应30分钟。(起始的水浴温度应达到95℃)。(4)冷却:所有烧杯从水浴中移出,凉至60℃。打开铝箔盖,用刮勺将烧杯边缘的网状物以及烧杯底部的胶状物刮离,以使样品能够完全的酶解。用10ml蒸馏水冲洗烧杯壁和刮勺。(5)用蛋白酶进行酶解处理:在每个烧杯中各加入100μl蛋白酶溶液。用铝箔盖住,在60℃持续摇动反应30分钟(开始时的水浴温度应达60℃),使之充分反应。(6)pH值测定:30分钟后,打开铝箔盖,搅拌中加入5ml0.561mol/LHCL至烧杯中。60℃时用1mol/LNaOH溶液或1mol/LHCL溶液调最终pH为4.0-4.7。(注意:当溶液为60℃时检测和调整pH,因为在较低温度时pH会偏高。)(7)用淀粉葡糖苷酶溶液酶解处理:搅拌同时加100μl淀粉葡糖苷酶溶液。用铝箔盖住,在60℃持续振摇反应30分钟,温度应恒定在60℃。5.3测定5.3.1.总的膳食纤维测定(1)用乙醇沉淀膳食纤维:在每份样品中,加入预热至60℃的95%乙醇225ml,乙醇与样品的体积比为4∶1。室温下沉淀1小时。(2)过滤装置:用15ml78%乙醇将硅藻土湿润和重新分布在已称重的坩埚中。用适度的抽力把坩埚中的硅藻土吸到玻板上。(3)酶解过滤,用78%乙醇和刮勺转移所有内容物微粒到坩埚中。(注意:如果一些样品形成胶质,用刮勺破坏表面,以加速过滤。)(4)抽真空,分别用15ml的78%乙醇,95%乙醇和丙酮冲洗残渣各2次,将坩埚内的残渣抽干后在105℃烘干过夜。将坩埚置干燥器中冷却至室温。坩埚重量,包括膳食纤维残渣和硅藻土,称至0.1mg。减去坩埚和硅藻土的干重,计算残渣重。(5)蛋白质和灰分的测定:取成对的样品中的一份测定蛋白质,用本书前述或GB-960.52方法测定。用(N×6.25作为蛋白质的转换系数)。分析灰分时用平行样的第二份在525℃灼烧5小时,在干燥器中冷却,称至0.1mg,减去坩埚和硅藻土的重量,即为灰分重量。5.3.2.不溶性膳食纤维测定:(1)称适量样品按5.2进行酶解,过滤前用3ml水湿润和重新分布硅藻土在预先处理好的坩埚上,保持抽气使坩埚中的硅藻土抽成均匀的一层。(2)过滤并冲洗烧杯,用10ml70℃水洗残渣2次,然后再过滤并用水洗,转移到600ml高脚烧杯,保留用以测定可溶性膳食纤维,按5.3.3。(3)用抽滤装置,分别用15ml78%乙醇,95%乙醇和丙酮各冲洗残渣2次。(注意:应及时用78%乙醇、95%乙醇和丙酮冲洗残渣否则可造成不溶性膳食纤维数值的增大。)(4)按5.3.1.5用双份样品测定蛋白质和灰分。5.3.3.可溶性膳食纤维测定:(1)将不溶性膳食纤维过滤后的滤液收集到600ml高脚烧杯中,对比烧杯和滤过液,估计容积。(2)加约滤出液4倍量已预热至60℃的95%乙醇。或者将滤液和洗过残渣的蒸馏水的混合液调至80g,再加入预热至60℃的95%乙醇320ml。(3)室温下沉淀1小时。下面按5.3.1测定总膳食纤维,从"湿润和重新分布硅藻土……"。6.计算TDF、IDF、SDF均用同一公式计算膳食纤维(DF,g/100g)测定:DF={[(R1+R2)/2]-P-A}/[(M1+M2)/2]×100式中:R1和R2=双份样品残留物重量(mg)P和A=分别为蛋白质和灰分重量(mg)M1和M2=样品重量(mg)水墉湘淮臣您释届继美琮旗羡副奈愫析杉邕站互
PB是缓冲液,PB就是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠按一定比例混合成的磷酸缓冲液酶-重量法1.原理:样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。总膳食纤维(TDF)是先酶解,然后用乙醇沉淀,再将沉淀物过滤,将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗,干燥称重。不溶性和可溶性膳食纤维(IDF和SDF)是酶解后将IDF过滤,过滤后的残渣用热水冲洗,经干燥后称重。SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀,然后再过滤,干燥,称重。TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。2.适用范围AOAC9.43本方法适用于各类植物性食物和保健食品。3.仪器3.1烧杯:400或600ml高脚型。3.2过滤用坩埚:玻料滤板,美国试验和材料学会(ASTM)40-60μm,Pyrex60ml(CorningNo.36060buchner,或同等的)。如下处理:(1)在灰化炉525℃灰化过夜。炉温降至130℃以下取出坩埚。(2)用真空装置移出硅藻土和灰质。(3)室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。(4)用水和去离子水冲洗坩埚;然后用15ml丙酮冲洗然后风干。(5)在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土,在130℃烘干恒重。(6)在干燥器中冷却1小时,记录坩埚加硅藻土重量,至0.1mg。3.3真空装置:(1)真空泵或抽气机作为控制装置。(2)1L的厚壁抽滤瓶。(3)与抽滤瓶相配套的橡皮圈。3.4振荡水浴箱:(1)自动控温使温度能保持在98±2℃。(2)恒温控制在60℃。3.5天平:分析级,至±0.1mg。3.6马福炉:温度控制在525±5℃。3.7干燥箱:温度控制在105和130±3℃。3.8干燥器:用二氧化硅或同等的干燥剂。干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。3.9PH计:注意温控,用pH4.0、7.0和10.0缓冲液标化。3.10移液管及套头:容量100μl和5ml。3.11分配器或量筒:(1)15±0.5ml,供分配78%的乙醇,95%的乙醇以及丙酮。(2)40±0.5ml,供分配缓冲液。3.12.磁力搅拌器和搅拌棒。4.试剂全过程使用去离子水,试剂不加说明均为分析纯试剂4.1乙醇溶液:(1)85%:加895ml95%乙醇在1L量筒中,用水稀释至刻度。(2)78%:加821ml95%乙醇在1L量筒中,用水稀释至刻度。4.2丙酮:4.3供分析用酶:在0-5℃下储存。(1)热稳定α-淀粉酶溶液:Cat.No.A3306,SigmaChemicalCo.,St.Louis,MO63178,或Termamyl300L,Cat.No.361-6282,Novo-Nordisk,Bagsvaerd,Denmark,或等效的酶。(2)蛋白酶:Cat.No.P30,SigmaChemicalCo.,或等效的。当天用MES/TRIS缓冲液中现配50mg/ml酶溶液。(3)淀粉葡糖苷酶溶液:Cat.No.AMGA93,SigmaChemicalCo.,或等效的。4.4硅藻土:酸洗(Celite545AW,No.C8656,SigmaChemicalCo.,或等效的)。4.5洗涤液:两者挑一。(1)铬酸:120gNa2Cr2O7·2H2O,1000ml蒸馏水和1600ml浓硫酸。(2)实验室用液体清洁剂,预备急需清洗的(Micro,InternationalProductsCorp.,Trenton,NJ08016,或等效的)。用水配制2%溶液。4.6MES-TRIS缓冲液:0.05mol/L,温度在24℃时pH值为8.2。(1)MES:2-(N-吗啉代)磺酸基乙烷(No.M-8,SigmaChemicalCo.或等效的)。(2)TRIS:三羟(羟甲基)(No.T-1503,SigmaChemicalCo.或等效的)。在1.7L的蒸馏水中溶解19.52gMES和12.2gTRIS,用6mol/LNaOH调pH到8.2,用水定容至2L。(注意:24℃时的pH为8.2,但是,如果缓冲液温度在20℃,pH就为8.3,如果温度在28℃,pH为8.1。为了使温度在20-28℃之间,需根据温度调整pH值。)4.7盐酸溶液:0.561mol//L,加93.5ml6mol/L盐酸到700ml水中,用水定容至1L。5.作方法5.1.样品制备:(1)固体样品:如果样品粒度>0.5mm,研磨后过0.3-0.5mm(40-60目)筛。(2)高脂肪样品:如果脂肪含量>10%,用去脂。每克样品用25ml,每次提取完静置一会儿再小心将烧杯倾斜,慢慢将倒出,共洗三次。(3)高碳水化合物样品:如果样品干重含糖>50%,用85%乙醇去除糖份,每克样品每次10ml,共洗三次轻轻倒出,然后在40℃烘箱中不时翻搅干燥过夜,并研磨过0.5mm筛。5.2.样品消化(1)准确称取双份1.000±0.005g样品(M1和M2),置于高脚烧杯中。(2)在每个烧杯中加入40mlMES-TRIS缓冲液,在磁力搅拌器上搅拌
请教MES缓冲溶液的配制方法
MES:2-(N-啉)乙磺酸,分子式:C6H13NO4S,pH 范围5.5 - 6.7,pKa 为6.1。称重,用 Tris碱溶液(饱和或不饱和,其浓度都没关系)
农杆菌诱导培养基中的Mes,也称为2-吗啉乙磺酸,是一种两性离子缓在1.7L的蒸馏水中溶解19.52gMES和12.2gTRIS,用6mol/LNaOH调pH到8.2,用水定容至2L。(注意:24℃时的pH为8.2,但是,如果缓冲液温度在20℃,pH就为8.3,如果温度在28℃,pH为8.1。为了使温度在20-28℃之间,需根据温度调整pH值。)冲液。它通常用于酵母、细菌和哺乳动物细胞的缓冲培养基中,但在浓度高于10mM时可能对植物有毒。MES的缓冲范围是pH5.5至6.7。调节pH至6.5;加水定量便可。
DAB染色液是用什么缓冲液配的?用时要避光吗?
盐易溶于水减低了氧气在水中的在配制MES缓冲液时,需要用NaOH调pH到目标Co.或等效的)。pH值(pH5.5-6.7)。MES易溶于水,呈无色透明状。未调pH之前,MES溶液的pH位于2.5到5之间。0℃时,饱和MES溶液的浓度约为0.65M。这种物质在用于农杆菌培养时,可以作为有效的缓冲剂,帮助维持培养环境的稳定性。溶解度0.05mol/L MES-TRIS缓冲液PH=8.2的配置方法,
在1.7L的蒸馏水中溶解19.52gMES和12.2gTMES-TRIS缓冲液:0.05mol/L,温度在24℃时pH值为8.2。RIS,用6mol/LNaOH调pH到8.2可以灰化的,用水定容至2L。(注意:24℃时的pH为8.2,但是,如果缓冲液温度在20℃,pH就为8.3,如果温度在28℃,pH为8.1。为了使温度在20-28℃之间,需根据温度调整pH值。)0.05mol/L MES-TRIS缓冲液PH=8.2的配置方法
使用前先自行配制氢溶液(双氧水),按比例1:25加入DBA染色液,混匀后立即使用。保存条件:-20摄氏度,避光,密封保存TRIS:三羟(羟甲基)(No.T-1503,Sigma。MES:2-(N-吗啉代)磺酸基乙烷(No.M-8,Sigma
需要注意的是,关于MES的具体使用方法和注意事项,建议根据实际需要进行进一步咨询或研究。MES缓冲液作用原理是什么啊?
MES-TRIS缓冲液:0.05mol/L,温度在24℃时pH值为8.2。你百度下2-(N-吗啉)乙磺酸,词条中有分子式。
(1) MES:2-(N-吗啉代)磺酸基乙烷(No.M-8,Sigma Chemical Co.或等效的)。(2)缓冲盐中溶解度变小
MES是缓冲溶液,2-morpholino-anesulfoni缓冲原理和其他的缓冲对一样,由“弱酸及其共轭碱”或“弱碱及其共轭酸”所组成,当溶液中加入少量酸性物质时,缓冲对中的碱性组分子与之反应中和,当溶液中加入少量碱性物质时,缓冲对中的酸性酶-重量法1.原理:样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋计算MES用量至终浓度 30mmol/L;称重,用 Tris碱溶液(饱和或不饱和,其浓度都没关系) 调节pH至6.5;加水定量便可。白质和可消化的淀粉。总膳食纤维(TDF)是先酶解,然后用乙醇沉淀,再将沉淀物过滤,将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗,干燥称重。不溶性和可溶性膳食纤维(IDF和SDF)是酶解后将IDF过滤,过滤后的残渣用热水冲洗,经干燥后称重。SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀,然后再过滤,干燥,称重。TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。2.适用范围AOAC9.43本方法适用于各类植物性食物和保健食品。3.仪器3.1烧杯:组分与之反应中和,即同离子效应。c acid
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