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1、cck8实验步骤:1、细胞种板:将对数生长期细胞用胰蛋白酶消化,配制成细胞悬液,每孔加入100 μl,使每孔细胞密度1000-5000个,边缘孔用无菌PBS填充。

2、5%CO2,37℃培养至细胞贴壁铺满孔底。

3、2、按实验方案加入物。

4、每种处理建议设置4-6个复孔。

5、3、处理结束后,每个孔中分别加入10 μl CCK-8溶液,轻轻敲击培养板混匀,培养箱中孵育1-4小时。

6、4、使用酶标仪测定450nm光吸收值,按公式计算物对细胞的抑制率。

7、注意事项1、如果暂时不测定OD值,可向每孔中加入10μl0.1M的HCl溶液或者1%SDS(w/v)溶液,室温避光保存,在24h内测定,吸光值不会发生变化。

8、2、如果待测物质有氧化性或者还原性,可在加CCK-8之前除去旧培养液,并用培养基洗涤两次,然后加入新鲜培养基,以去除影响。

本文到这结束,希望上面文章对大家有所帮助。