emb培养基_emb培养基属于什么类型培养基
emb培养基是什么培养基
agar伊红美蓝琼脂培养基。
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根据查询百度百科显示,EMB琼脂培养基 EMB(Eosin Mylene Blue)agar伊红美蓝琼脂培养基的简称。是为了观察某种糖被分解后是否产生酸的一种培养基。此培养基含有酩蛋白样的氨基酸混合物、酵母浸液、适量的无机盐、0.04%的伊红Y、0.0065%的美蓝和供作试验的糖。常用于食品、乳制品、水源和病源标本中的革兰氏阴性肠道菌的分离和鉴别。
用此培养基进行平面培养时,若糖被分解,菌落成深紫色;若不被分解,则成浅粉色。1947年列德堡(J.Lederberg)用大肠杆菌进行接合实验时,曾用这种培养基检测各种糖的发酵性。以后被用来进行大肠杆菌的许多遗传实验。
什么是鉴别培养基?试以EMB 为例,分析其鉴别作用原理。
鉴别培养基是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼鉴别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基。EMB
培养基中的伊红和美蓝可抑制革兰氏阳性菌和一些难养的革兰氏阴性菌。产酸菌由于产酸能力不同,菌体表面带质子,与伊红美蓝结合从而有不同的颜色反应,可用肉眼直接判断。
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滤膜法测大肠杆菌的培养基
(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶,这些实验仪器都需要经过灭菌处理,与过滤有关的作都要在酒精灯火焰旁进行,防止杂菌的污染.
(2)待测水样过滤完之后,还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上,此时可以在无菌条件下,用无菌水冲洗滤杯,再次过滤,将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上.
(3)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上,属于微生物培养中的接种作.从功能上看,该培养基中含有伊红美蓝,因此EMB培养基属于鉴别培养基.
(4)无菌作下将90ml无菌水加入到10ml待测水样中,这样就将待测水样稀释了10倍;根据大肠杆菌鉴定的原理可知,黑色菌落为大肠杆菌,因此1升待测水样中的大肠杆菌数目=5×(1000÷10)=500个.
(5)若要测定待测水样中酵母菌的数目,酵母菌属于真核生物,大肠杆菌属于原核生物,真核细胞的直径比原核细胞大,因此应更换上述过滤装置中的滤膜,选择孔径更大的滤膜.
故为:
(1)滤杯、滤膜和滤瓶
(2)无菌条件下用无菌水冲洗滤杯,再次过滤
(3)接种 鉴别
(4)10 500
(5)更大
伤寒杆菌在emb培养基上的形态特征
伤寒杆菌实际上是伤寒沙门氏菌,沙门氏菌是不分解乳糖的。而EMB琼脂培养基含有的糖类是乳糖,所以沙门氏菌在EMB上不会产生颜色,为无色或琥珀色半透明菌落。菌落湿润,相对比较大。因此,伤寒沙门氏菌在EMB琼脂培养基上的菌落形态并不十分典型。
大肠杆菌在emb培养基上的典型特征,为什么
紫红色菌落,黑色中心,有或没有金属光泽,菌落中等偏小。
原理:
当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与美蓝结合形成紫黑色菌落,并带有绿色金属光泽。而产气杆菌则形成呈棕色的大菌落。
在碱性环境中不分解乳糖产酸的细菌不着色,伊红和美蓝不能结合,故沙门氏菌等为无色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培养基上不生长。
制备MAC.EMB.SS培养基的目的
用来培养细菌,从而进行对于细菌的观察和实验.
配置培养基需要:
1、根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。
2、注意各种营养物质的浓度及合适配比,保持合适渗透压。
3、将培养基的pH控制在适宜的范围之内,以利于不同类型微生物的生长繁殖或代谢产物的积累。
4、要注意各种原料的配比,每种培养基的配比合适的配比,可以按照老师的要求去做。
5、如需要加热的时候注意时间的把握。
培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。
EMB培养基含有哪几种主要成分?在检查大肠菌群时,各起什么作用?
用途:弱选择性培养基,用于肠道菌的选择性分离
配方:(g/L)
蛋白胨
10.0
乳糖
10.0
磷酸氢二钾
2.0
琼脂
15.0
伊红
0.4
美蓝0.065
pH值7.1
±0.2
25℃
原理:
蛋白胨提供碳源和氮源;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;磷酸氢二钾是缓冲剂;琼脂是培养基凝固剂;伊红和美蓝是抑菌剂和pH指示剂,可抑制革兰氏阳性菌,在酸性条件下产生沉淀,形成紫黑色菌落或具黑色中心的外围无色透明的菌落。
用法:
称取本品
37.4g,加热搅拌溶解于
1000ml
蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌
15分钟,
备用。
鉴别培养基的介绍
EMB培养基常用于鉴别E.coli蛋白胨10g 乳糖5g 蔗糖5g 磷酸氢二钾2g 伊红Y 0.4g 美蓝0.065g 蒸馏水1000g pH7.22216E培养基配方分离海洋微生物的培养基配方蛋白胨 5g 酵母膏1g 磷酸高铁 0.01g 琼脂15~20g 陈海水 1000ml 煮沸(5%)的溶液调PH值7.6~7.8伊红美蓝培养基可用于检测水中大肠杆菌的含量首先按以下组成配制基础培养基。蛋白胨10g NaCl 5g琼脂15~20g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL,调节pH为7.6.灭菌后,冷却至60℃左右,再按下面的比例,在无菌作条件下加入灭菌的乳糖溶液、伊红水溶液以及美蓝水溶液。摇匀后,立即倒平板。溶液中的乳糖在高温下会破坏,因此一般使用压力为70kPa、温度为115℃的条件灭菌20min.基础培养基 100mL 20%乳糖溶液2mL2%伊红水溶液 2mL 0.5%美蓝水溶液1mL
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