倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜有什么区别

荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别

科普倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜有什么区别?科普倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜有什么区别?


科普倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜有什么区别?


科普倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜有什么区别?


激光共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。主要系统包括激光光源、自动显微镜、扫描模块(包括共聚焦光路通道和针孔、扫描镜、检测器)、数字信号处理器、计算机以及图象输出设备(显示器、彩色打印机)等。通过激光扫描共聚焦显微镜,可以对观察样品进行断层扫描和成像。因此,可以无损伤的观察和分析细胞的三维空间结构。

同时,通过激光扫描共聚焦显微镜也是活细胞的动态观察、多重免疫荧光标记和离子荧光标记观察的有力工具.地对光谱的本质进行分析,区分发射光谱高度重叠的不同标记的信号。

最重要的是,对于多色的荧光染色,它能消除了荧光串色的影响,同时限度的减少了样品荧光信号的损失。这些都是一般光镜所不能达到的。

科室小白,想请问一下,倒置荧光的显微镜和激光共聚焦的主要异在哪?

主要区别如下:

1、按照物镜与载物台的相对位置,激光共聚焦显微镜有正置和倒置两种。

2、激光共聚焦显微镜使用激光作为光源,倒置荧光显微镜光源多为金属卤素物、LED而不是激光;

3、激光共聚焦显微镜在相机之前有针孔或者狭缝,以达到过滤掉非焦平面光信号的目的。普通倒置荧光显微镜没有针孔或者狭缝去除非焦平面光信号,因此成像较激光共聚焦显微镜明显模糊;

4、应用方向不同,激光共聚焦显微镜主要用于活细胞荧光、厚细胞层或细胞球、厚组织、体外培养的类器官等的清晰观察和成像,拍摄的图像常被用于分析。普通倒置荧光显微镜只适用于单层细胞、薄组织切片等较薄、背景信号较弱的观察和成像,拍摄的图像背景信号较高时不适应后期分析;

5、价格方面,由于硬件和软件功能上的成本,激光共聚焦显微镜价格高于普通倒置荧光显微镜;

有比较的激光共聚焦显微镜品牌吗?

奥林巴斯。它可以全方位对数据进行采集,显微镜根据软件生成的实验扫描样品,不会丢失数据或重复工作。它的彩色图谱可以帮助我们了解实验数据并验证是否存在数据的丢失和错误。如果存在问题,也能让我们可以尽早地发现问题并解决问题。

激光共聚焦显微镜用途

显微镜的应用广泛,实验数据可靠,分析处理软件功能丰富。在细胞及分子生物学、物筛选、大脑和神经科学、免疫学、形态学、食品卫生、发酵、遗传学、理学等领域具有不可替代的作用。

激光共聚焦显微镜由显微镜光学系统、激光光源、扫描器及检测及处理系统4部分组成,采用相干性较好的激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对图象进行处理的一套观察、分析和输出系统。

激光共聚焦显微镜原理

以共聚焦显微技术为原理的共聚焦显微镜主要采用3D捕获的成像技术,它通过数码相机针孔的高强度激光来实现数字成像,具有很强的纵向深度的分辨能力。

共聚焦显微镜成像原理共焦显微镜装置是在被测对象焦平面的共轭面上放置两个小孔,其中一个放在光源前面,另一个放在探测器前面,如图所示。

共焦显微镜光路示意图

得到的图像是来自一个焦平面的光通过针孔数码相机聚焦拍摄,通过所累积的不同焦平面的图像序列,使用软件编译完整的 3d 图像。

材料型激光共聚焦显微镜为什么用405激光

材料型激光共聚焦显微镜用405激光可满足大部分荧光样品的测试要求。激光扫描共聚焦显微技术(LaserScanningConfocalMicroscopy)是上世纪80年代中期发展起来的一种光学成像技术,可以在不损伤样品的条件下对样品进行深层形态结构分析,具有成像速度快、分辨率高(与普通光学显微镜相比)、制样要求低、可对样品进行三维重建、与样品不直接接触,可实时反映样品表面或内部真实情况等特点,广泛应用于材料学、生物学、医学和地质学等研究领域。LeicaTCSSP5型激光共聚焦显微镜为倒置显微镜,适用于生物样品的观察。其拥有四个激光器,可发射405nm、458nm、476nm、488nm、514nm、543nm和633nm激光,可满足大部分荧光样品的测试要求,除了可对样品进行三维重构外,其拥有的多种扫描模式还可以提供荧光波长探测、时间序列扫描、荧光漂白恢复、荧光共振能量转移等测试服务。

激光共聚焦显微镜的原理

激光共聚焦显微镜脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式,激光扫描共聚焦显微镜光路图采用激光束作光源,激光束经照明针孔,经由分光镜反射至物镜,并聚焦于样品上,对标本焦平面上每一点进行扫描。

激光可以代替日光和灯光等。冷光源用激光可以加大分辨率。

激光共聚焦显微镜的工作原理是什么?如何准备流式细胞的实验样品

采用点光源照射标本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜收集,并沿原照射光路回送到由双向色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。两者的几何尺寸一致,约100-200nm;相对于焦平面上的光点,两者是共轭的,即光点通过一系列的透镜,最终可同时聚焦于照明针孔和探测针孔。这样,来自焦平面的光,可以会聚在探测孔范围之内,而来自焦平面上方或下方的散射光都被挡在探测孔之外而不能成像。以激光逐点扫描样品,探测针孔后的光电倍增管也逐点获得对应光点的共聚焦图像,转为数字信号传输至计算机,最终在屏幕上聚合成清晰的整个焦平面的共聚焦图像。