PDA培养基的配制方法是什么?

PDA培养基的配方

pda培养基的制备实验结论(pda培养基的制备实验报告)pda培养基的制备实验结论(pda培养基的制备实验报告)


pda培养基的制备实验结论(pda培养基的制备实验报告)


土豆 200g

葡萄糖 20g

琼脂 15~20g

水 1000mL

pH值 自然

PDA培养基的配制

称量和熬煮 按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。

加热溶解 把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。

分装 按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

加棉塞 培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。

包扎 加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

棉塞制作说明

棉塞的作用:一是防止杂菌污染;二是可过滤空气,保证通气良好,并可减缓培养基水分的蒸发,所以正确地制备棉塞是培养基制备中重要的一环。

正确的棉塞是形状、大小,松紧应与试管口(或三角烧瓶)完全适合。过紧则妨碍空气流通,作不便;过松时,空气会毫无障碍地进入试管(或三角烧瓶)中,达不到灭菌的目的。棉塞过小往往易掉进试管内,因此棉塞质量的优劣对实训的结果有很大的影响。正确的棉塞头较大,加塞时,应使棉塞长度的1/3留在试管口外,2/3在试管口内。目前,有条件的实训室已使用坚固的塑料试管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞,制作棉塞要选纤维较长的棉花,一般不选用脱脂棉。因为它容易吸水变湿,造成污染,而且价格也贵。

PDA培养基配制注意事项

培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。

PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。

培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。

培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.2g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性。

PDA液体培养基如何配置

其做法是称取200g马铃薯,洗净去皮切成小块,加水煮烂(煮沸20到30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用四层纱布过滤,再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管,加塞、包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。

具体配方:马铃薯 200克

葡萄糖 20克

琼脂 15到20克

蒸馏水 1000毫升

自然PH

瓶底出现絮状物可能是由于过滤的不充分。

pda综合培养基怎么制作

PDA琼脂培养基主要用于真菌的培养,配方有很多种,而且可以根据实际需要进行调整,也可以使用马铃薯煮水作为配方成分之一。

例如:

称取200g马铃薯,洗净去皮切碎,加水1000ml煮沸半个小时,纱布过滤,再加10-20g葡萄糖和

17-20g琼脂,充分溶解后趁热纱布过滤,分装,高压蒸汽灭菌(121℃)灭菌20分钟。

母种培养基如何制作?

上述7个培养基配方中,马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基(PDA)应用最普遍,在此着重介绍PDA培养基的配制方法。

(1)配制选择优质马铃薯,去皮,挖去发芽根,削去青皮切成薄片,称取200克,置于钢精锅或铝锅,加水1000毫升,煮沸后小火保持30分,用4层纱布过滤,取其汁液(上述配方中麸皮、米糠、玉米粉、黄豆粉、木屑等用同法取其汁液)。若滤液不足1000毫升,加水补足。然后加入琼脂继续加热,待琼脂完全溶化后,再加入葡萄糖,补水至1000毫升,用玻璃棒搅拌均匀,趁热分装试管或三角瓶中备用。(2)分装试管将配制好的PDA培养基,趁热到入事先准备好的分装器或漏斗、量杯,分装试管。每支试管培养基为管长的1/5~1/4,培养基液不可黏附管口内壁,如有黏附物必须擦试干净,以防杂菌感染。(3)塞棉塞棉塞要紧贴管壁,松紧度以用手指提起棉塞而不脱掉为宜,光圆不起皱,插入管口的长度为棉塞总长的2/3。然后将塞好棉塞的试管绑扎成捆,管口棉塞处用牛皮纸包扎好,以防灭菌时棉塞受潮,引起杂菌感染。(4)灭菌将包扎成捆的试管,放入手提式高压灭菌锅内,在0.15兆帕压力下灭菌30分钟。使用手提式高压锅时必须按要求进行作,特别要注意加水和熄火这两个技术环节,以防烧锅、水浸试管和试管破裂、冲塞等人为。(5)排成斜面将取出的试管冷却到50~60℃后,放到用木架或木条摆成一定角度的斜面上,使之凝成斜面,倾斜度以斜面达到管长的1/2为度。待完全凝固后,即成试管斜面培养基,供分离、培养母种用。(6)检验随机抽取3~5支试管,置于25~30℃下培养3天左右进行培管查杂。若所查试管培养基表面或内部均无任何变化,则表面灭菌效果好,可供接种培养用;若个别试管的斜面上有杂菌菌落,说明灭菌不,要重新灭菌。这种检验不是每次灭菌时都要进行,一般在新购灭菌锅灭菌时或中途长时间未用和随机抽验时才进行这种检验的。

PDA培养基,牛肉膏蛋白胨培养基的配方

1.PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

配方:

马铃薯 200克 葡萄糖 20克

琼脂 15~20克 蒸馏水1000毫升

自然PH

2.牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨琼脂培养基是一种应用十分广泛的天然培养基,其中的牛肉膏为微生物提供碳源、和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,NaCl提供无机盐

配方:

牛肉膏:3.0g

蛋白胨:10.0g

NaCl:5.0g

琼脂:15-25g

水:1000ml

pH:7.4-7.6

扩展资料

PAD培养基的配制步骤

其做法是先洗净去皮,再称取200g马铃薯切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用八层纱布过滤,加热,再据实际实验需要加15-20g琼脂,继续加热搅拌混匀

待琼脂溶解完后,加入葡萄糖,搅拌均匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管或者锥形瓶,加塞、包扎,(115℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀,冷却后贮存备用。

参考资料百度百科PAD培养基

百度百科牛肉膏蛋白胨

pda培养基的配置原理

PDA培养基的配制方法

马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基是分离菌物和细菌的常用培养基,其做法是称取200g马铃薯,洗净去皮切碎,加水1000ml煮沸半个小时,纱布过滤,再加10-20g葡萄糖和17-20g琼脂,充分溶解后趁热纱布过滤,分装试管,每试管约5-10ml(视试管大小而定),15磅蒸气(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。