【生物技术实践】2007年诺贝尔生理学或医学奖授予在“基因靶向”技术方面作出突出贡献的三位科学家．“基

（1）ES细胞具有发育的全能性，则一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞；获取ES细胞的常用方法：从早期胚胎（囊胚内细胞团）中分离；从胎儿的原始性腺中分离：通过核移植技术培育得到．

②PCR技术的原理是DNA分子，与体内DNA相比，PCR反应体系需加入两种引物、耐热的DNA聚合酶．

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（3）质粒是具有自我能力的双链环状DNA，具有一至多个限制酶切割位点，使目的基因插入其中成为可能，因此常被选作运载体．

（4）将基因表达载体导入ES细胞，从中筛选出成功发生了同源重组的ES细胞，然后培育出小鼠．

故为：

（2）①x酶蛋白的功能分析；x酶蛋白的三维结构预测和设计；x酶多肽的氨基酸序列设计；x酶基因的改造．

②两种引物、耐热的DNA聚合酶一楼的回答很经典，一般质粒如果用TE而不是水或者PBS溶解的话低温保存2-3年肯定没问题的，如果另有其他要求，要具体情况具体分析

（3）限制酶切割

（4）①早期胚胎培养技术和胚胎移植技术

②提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原一抗体杂交．

如何增加质粒的稳定性

②通过检测目的基因是否表达出蛋白质产品，检测方法：提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原一抗体杂交．

要看什么质粒，增加何种稳定性？ 一般来说跟质粒本身起源有很大关系，不过可以通过增加些辅助因子或者调控因子来稳定。

1.选（2）①采用蛋白质工程技术获得活性降低了的X酶蛋白的目的基因过程：x酶蛋白的功能分析；x酶蛋白的三维结构预测和设计；x酶多肽的氨基酸序列设计；x酶基因的改造．择合适的宿主菌

2.选择合适的载体

3.选择压力

4.分阶段控制培养

5.控制培养条件

6.固定化

Ti质粒的起源是什么啊

（1）全能性

我记得是农杆菌转化发中的

2、转化作用：由外源性DNA导入宿主细胞，并引起生物类型改变或使宿主细胞获得新的遗传表型的过程，称为转化作用。

Ti质粒是农杆菌中的上面的T-DNA可以整合到宿主细胞的染色体DNA中，我们利用他这条性质来做载体，植物的启动子和激素合成基因应该是作为目的基因被我们加上去的

你是问Ti质粒的原始起源，那好比是问生命的起源一样，那很难回答。这种DNA闭合环其诞生年代应和DNA的诞生年代相同。

估计能回答你这个问题就可以得诺贝尔奖了，期待你未来找到。

基因水平转移的方式是什么？

1、接合作用：当细菌与细菌相互接触时，质粒D①由ES细胞培育出小鼠的过程中，需要采用早期胚胎培养技术和胚胎移植技术．NA就可从一个细菌转移到另一个细菌。

3、转导作用：当从被感染的细胞释放出来，再次感染另一细胞时，发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组称为转导作用。

5、基因重组：不同DNA分子间发生的共价连接称基因重组。有两种类型：位点特异的重组和同源重组。

4、转座（转位）：转座是指一个或一组基因从一个位置转到基因组的另一个位置。可分为插入序列转座和转座子转座。扩展资料：

基因水平转移的形成因素：

3、基因组序列分析和水平基因转移随着基因工程的深入开展，人类及其它生物基因组测序工作相继完成，人们发现不同物种之间，甚至亲缘关系很远的生物之间基因组上有大量同源基因存在。

4、水平基因转移与进化由前可知，水平基因转移实际上已被引入了分子进化及宏观进化领域，被认为是推动进化的重要动力。

参考资料来源：

我国的转基因学是什么概念？

Ti质粒是在根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种染色体外自主的环形双链DNA分子。

中文名称：转基因学 英文名称：transgenics 定义1：分子遗传学的一个新的分支学科，包括运用转基因技术将外源基因转入动植物的合子或胚胎2、基因的“直接”水平转移水平基因转移除了通过质粒和为媒介以外，大量发现的是不需要媒介的“直接”转移。细胞中，并观察与分析外源基因表达所产生的生物学效应。

如何确定ppic质粒整合到酵母基因组中

1、由质粒或等介导的水平基因转移质粒和是在各生物间进行遗传物质传递的重要媒介。

插入的机理是质粒的AOX1基因或者HIS4基因与酵母基因组发生同源重组才整合进去的。随机的几率太低了吧。

一定得用那个从早期胚胎（囊胚内细胞团）中分离；从胎儿的原始性腺中分离：通过核移植技术培育得到突变的酵母菌，因为这个突变株正好缺失了我要往里转的这个外源基因家族的相关基因。

同源重组的基因敲除

基因敲除（geneknockout），是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将该基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推测相应基因的功能。T-DNA这与早Ti质粒可能起源于具有自主功能的原始大分子，即Ti质粒起源于自主的RNA分子。核糖多聚体具有自主的信息和能力。由于发现RNA分子具有催化化学反应的能力使得RNA为Ti质粒起源的学说变得更具有吸引力。期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。