液相混合器不稳定 液相混合器不稳定怎么办
液相色谱,基线不稳定噪声大怎么解决?
基线噪音(规则的)原 因解决方法1、在流动相、检测器或泵中有空气1、流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。2、漏液2、见第三部分。检查管路接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换泵密封。3、流动相混合不完全3、用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂4、温度影响(柱温过高,检测器未加热)4、减少异或加上热交换器5、在同一条线上有其他电子设备5、断开LC、检测器和记录仪,检查干扰是否来自于外部,加以更正。6、泵振动6、在系统中加入脉冲阻尼器 基线噪音(不规则的)原 因解决方法1、漏液1、见第三部分。检查接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换密封。检查流通池是否漏液。2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成2、检查流动相的组成。3、流动相各溶剂不相溶3、选择互溶的流动相4、检测器/记录仪电子元件的问题4、断开检测器和记录仪的电源,检查并更正。5、系统内有气泡5、用强极性溶液清洗系统6、检测器内有气泡6、清洗检测器,在检测器后面安装背景压力调节器7、流通池污染(即使是极少的污染物也会产生噪音。)7、用1N的(不能用磷酸)清洗流通池8、检测器灯能量不足8、更换灯9、色谱柱填料流失或阻塞9、更换色谱柱10、流动相混合不均匀或混合器工作不正常10、维修或更换混合器,在流动相不走梯度时,建议不使用泵的混合装置基线漂移原 因1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。)解决方法:控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器图2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。)解决方法:使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用氦气。3、流通池被污染或有气体解决方法:用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1N的。(不要用盐酸)4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线)解决方法:取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。5、流动相配比不当或流速变化解决方法:更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时解决方法:用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成解决方法:检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂8、样品中有强保留的物质(高K’值)以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。8、使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。9、使用循环溶剂,但检测器未调整。解决方法:重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时,使用新的流动相。10、检测器没有设定在吸收波长处。解决方法:将波长调整至吸收波长处
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高效液相色谱基线向下飘是什么原因
流动相的基线总是会漂移的,即使是等度洗脱。如果一个小时内漂移在0.5mAU之内的话,完全可以忽略。
然后说到基线往下飘,最容易想到的就是流动相中,有机相的比例在减少。造成这样的原因有很多:
1. 流动相有没有混合均匀。
2. 环境温度是否比较高,流动相瓶的瓶口有没有盖起来。如果温度较高,又敞口放置,有机相挥发得较快,因此流动相中的配比也在逐渐的发生变化。
3. 第三个可能性比较小,如果用的是两个泵做梯度洗脱,那么泵的运行是否异常。这一点可以查看最近一次的校验记录,看看误是否在允许范围内。
目前我就想到这些,希望能有些帮助。
有多种原因,首先流动性是否过滤,若流动性中有气泡很容易照成基线漂移,还有你使用的是什么检测器啊,
他们说的复杂了。
只要看几点
1 等度时候压力稳不稳。压力不稳就是可能泵的问题或混合器的问题。基线不稳基本不会和流动相气泡什么的有很大关系。
2 看泵停掉的情况下检测器响应电压稳不稳。如果不稳检测器问题,基本上自己很难解决。
3 色谱柱问题这个说来就复杂了但是我想你不可能就1根柱子吧。
我做高效液相时 改变了流动相的条件,但是什么都没有进 却有峰出现,是为什么啊 ?
最有可能是柱中有残留,在原条件下洗脱不出来,换了条件后,肯定就出来了。
可能是流动相中的气泡挤了出来,
或者您的混合器有问题,
又或者是柱子中原来留在柱中的物质洗脱了出来~~~~~
建议您首先排除人为失误导致的遗漏~~~
不同的流动相,冲出柱子的成分肯定是不同的
这就是为什么换流动相之后都需要稳定基线,再进样
而且实验前后都要进行基线稳定,就是为了排除诸如此类的干扰
液相色谱,不加样,用双流动相梯度跑程序,基线总是像阶一样往下走,是什么原因啊?
不知道您使用的是那种液相色谱仪器,我想可能是您仪器的流动池被污染了,您可以尝试去清洗下,
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没平衡好呗,用万用表测定一下输出信号的电压,看看和图是否一致
多平衡平衡,一般1个小时到1个半小时后还没明显好转,
考虑色谱柱和混合器,一般就这两个地方出问题多点
可以换根色谱柱试试,或者卸掉色谱柱
伊利特高效液相色谱入柱之前混合器堵怎么办
遇到色谱系统的压力过高,首先判断压力产生的部位,可以用分段拆卸的方法判断,一般从后向前拆,先断开色谱柱与检测器的链接,压力不下降或降低不明显,检测器没有堵塞,否则检测器堵塞;再拆掉色谱柱,压力明显下降,色谱柱有问题,反之泵的出口堵塞,色谱柱没问题.当确定是色谱柱的问题后有以下原因:
1)保护柱或柱头吸附了大量的不能洗脱的物质,如长期用甲醇溶解的中样品或含有高分子材料、蛋白质的样品,长期使用后,那些不能溶解在流动相中的物质会在柱头或保护柱析出,堵塞色谱柱,柱压升高.
2)多元泵使用缓冲盐溶液和有机相混合,缓冲液的浓度过高或有机相的比例过大,混合后缓冲盐在柱头析出,柱压升高.
3)流动相甲醇的比例在45%-60%之间,这一比例范围的流动相本身粘度大,柱压升高.
4)长期不使用的色谱柱,溶剂挥干,使用的初期柱压升高.
5)长期不使用色谱柱,饱和色谱柱的溶液是水或低浓度甲醇(浓度小于10%),色谱柱内有细菌滋生,柱压升高.
6)未养成及时清洗色谱柱的习惯,前面实验的样品残留未及时冲洗.
7)使用含有缓冲盐的流动相,在更换流动相前未用10%的甲醇或水冲洗色谱柱,导致缓冲盐在色谱柱析出.
8)保护柱已经失效或过,及时更换.
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