细胞培养技术pdf_细胞培养技术员工作累吗

名词解释，细胞培养

细胞培养技术也叫细胞克隆技术；

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是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使期生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。

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是指从动物活体体内取出组织，于模拟体内生理环境等特定的体内条件下，进行孵育培养，使之生存并生长

细胞培养技术叫细胞克隆技术。整个生物工程技术过程中细胞培养都是一个必不可少的过程。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞。细胞培养是生物技术中核心、基础的技术。

cell culture,细胞培养，既包括微生物细胞的培养，细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术必不可少的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。

什么是细胞培养，细胞培养成功的关键因素是什么

细胞培养的概念：

细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术必不可少的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来，所以可以说细胞培养技术是生物技术中核心、基础的技术。

细胞培养成功的关键因素：

1.要保证无菌,包括无菌作,无菌环境.枪头等要及时灭菌,培养瓶,移液管使用一次性的,如果你的细胞比较不好养,使用一次性的.

2.要传代的时候细胞传代的数量不能太少,否则细胞不容易养活.另外,传代不要过度频繁,即使是肿瘤细胞.

3.不要经常用胰酶消化细胞,且消化时间不要过长.

4.根据细胞生长情况,即使更换新鲜培养基.

5.血清一般要冻存在-20摄氏度,用的时候在4摄氏度融化,不要反复冻存,用10ml的离心管分装使用.

细胞培养的目的与意义

⒈可以进行植物体外受精及 植物胚胎发育过程研究。

⒉可以进行植物生长发育有关的重要基因或影响因素的研究。

⒊可以方便地通过实验手段培育植物新品种

什么是细胞培养技术

细胞培养技术是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养技术指的是细胞在体外条件下的生长，在培养的过程中，培养物是单个细胞或细胞群。细胞在培养时都要生活在人工环境中，由于环境的改变，细胞的移动或受一些其他因素的影响，培养时间加长，传代导致细胞出现单一化型。

细胞培养技术也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术必不可少的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用技术，通过细胞培养既可以获得大量细胞，又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。

一、动物细胞培养

在所有的细胞离体培养中，困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。

⑴血清：动物细胞离体培养常常需要血清。常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。

⑵支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃，塑料等作为支持物。

⑶气体交换：二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节，不断维持所需要的气体条件。

二、植物细胞培养

⑴光照：离体培养的植物细胞对光照条件不甚严格，因为细胞生长所需要的物质主要是靠培养基供给的。但光照不但与光合作用有关，而且与细胞分化有关，例如光周期可对性细胞分化和开花调控作用，所以以获得植株为目的的早期植物细胞培养过程中，光照条件特别重要。以植物细胞离体培养方式获得重要物质，如物的过程，植物细胞大多是在反应器中悬浮培养。

⑵激素：植物细胞的分裂和生长特别需要植物激素的调节，促进生长的生长素和促进细胞分裂的分裂素是基本的激素。植物细胞的分裂，生长，分化和个体生长周期都有相应的激素参与调节。和动物细胞相比，植物细胞离体培养对激素要求的原理已经了解，其应用技术也已相当成熟，已经有一套能使用的培养液。同时解决了植物细胞对水、营养物、激素、渗透压、酸碱度、微量元素等的需求。

三、微生物细胞培养

微生物多为单细胞生物，野生生存条件比较简单。所以微生物人工培养的条件比动植物细胞简单得多。其中厌氧微生物培养比好氧微生物复杂，因为严格厌氧需要维持二氧化碳等非氧的惰性气体浓度，而好氧微生物则只需要通过不断搅拌提供无菌氧气。微生物对培养条件要求不如动植物细胞那样苛刻，玉米浆、蛋白胨、麦芽汁、酵母膏等成为良好的微生物天然培养基。对于一些特殊微生物的营养条件要求，可以在这些天然培养基的基础上额外添加。

细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项

细胞培养是一种常见的生物技术，其步骤主要包括以下几个方面：

常规准备：细胞培养基，胎牛血清，无菌作器具等；

细胞分离：将细胞悬浮液通过培养基离心分离并为单一细胞状态；

细胞计数：使用细胞计数板，显微镜等设备检测细胞浓度；

接种细胞：将细胞悬浮液加入预处理好的培养器皿中；

细胞培养及维护：放到合适的培养环境中，进行有利的生长处理（悬浮细胞与贴壁细胞的处理方式各有区别）

细胞检测及分裂：在一定时间内，对细胞进行检测，记录细胞数及细胞器发育情况；

细胞使用或保存：细胞可以在需要时被收获，进行进一步的科研工作，或保存在液氮罐中，以备后续使用。

进行细胞培养时，需要注意以下几点：

确保无菌作：细胞培养应在无菌环境下进行，必要时可使用生物安全柜进行作；

控制细胞温度：在适宜的器皿中提供恰当的温度，对于不同类型的细胞，温度和环境要求是不同的；

细胞培养基成分：细胞培养基中有多种成分，一些有组分具有强烈的耗竭作用，应及时更换培养基以供养细胞；

细胞处理方法：细胞处理时使用具有其细胞类型特异性的方法；

合适的接种密度：不同类型的细胞要求不同密度的接种，过高或过低的细胞密度均会对细胞的生长和分裂产生不良影响；

手套和口罩等保护作：需要保护自己以及细胞免于污染和交叉感染。

因此，在进行细胞培养时，需要细心、耐心和科学地作，这样才能够顺利地进行和成功地完成细胞培养工作。